本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)原理，酶標(biāo)板固相包被人單核細(xì)胞增多性李斯特菌素O特異性抗體，樣本中的LLO抗原與包被抗體特異性結(jié)合，孵育洗滌后加入酶標(biāo)記二抗形成免疫夾心復(fù)合物，酶催化底物顯色，終止反應(yīng)后檢測(cè)吸光度，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線精準(zhǔn)定量樣本中LLO的含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人單核細(xì)胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA試劑盒
英文名稱：LLO Elisa Kit
貨號(hào)：Y-E556
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢出 0.05ng/mL
檢測(cè)范圍：0.12ng/mL - 4.8ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：捕獲孵育 95min，二抗 55min，顯色 24min，總 174min
顯色系統(tǒng)：即用型 TMB 顯色試劑
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm
特異性：特異性結(jié)合李斯特菌 LLO 溶血素，與其他細(xì)菌溶血素?zé)o交叉
重復(fù)性：板內(nèi) CV＜8.5%，板間 CV＜10.0%
注意事項(xiàng)：活菌樣本需滅活處理后再檢測(cè)，操作全程生物安全二級(jí)防護(hù)
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說(shuō)明書(shū)，不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開(kāi)使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果
顯色過(guò)程需避光，避免陽(yáng)光直射影響結(jié)果
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
整套試劑盒室溫放置 44min，稀釋濃縮洗滌緩沖液，按需取用包被酶標(biāo)板條，密封剩余試劑。
LLO 梯度標(biāo)準(zhǔn)品每孔加 50μL，細(xì)菌培養(yǎng)上清樣本稀釋后上樣 50μL，空白對(duì)照孔添加稀釋緩沖液。
所有孔位加入酶偶聯(lián)檢測(cè)工作液 100μL，封板封口，震蕩混勻 30s。
37℃密閉避光孵育 78min，保證抗原抗體充分夾心結(jié)合。
手動(dòng)洗板 6 次，單次浸泡 29s，徹底棄除孔內(nèi)廢液并拍干板條。
避光依次加入顯色 A、B 液各 50μL，混勻后 37℃避光顯色 24min。
終止液終止酶促反應(yīng)，16min 內(nèi) 450nm 測(cè)定 OD 值，計(jì)算李斯特菌素 LLO 濃度。
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關(guān)鍵字： 人單核細(xì)胞增多性李斯特菌素O;LLO;ELISA試劑盒;
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