本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測原理,酶標板微孔預先包被抗人百日咳毒素(PT)特異性捕獲抗體,加入待測樣本和梯度標準品后,樣本中的PT抗原與固相抗體特異性結合,洗板去除未結合的雜蛋白與雜質(zhì);隨后加入HRP標記的PT檢測抗體,形成穩(wěn)定的免疫復合物,經(jīng)底物催化顯色、終止液終止反應后,酶標儀檢測吸光度值,吸光度與樣本中PT含量呈正相關,結合標準曲線可精準定量檢測樣本中百日咳毒素的濃度。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 人百日咳毒素(PT)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E575 |
英文名稱 | PT Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最低檢出 0.04 ng/mL
檢測范圍:0.08 ng/mL ~ 5 ng/mL
反應時間:樣本孵育 140min,二抗 80min,顯色 20min
顯色系統(tǒng):雙液混合 TMB 顯色液
檢測波長:450nm
特異性:特異性捕獲百日咳毒素,對白喉毒素、破傷風毒素無交叉反應
重復性:批內(nèi) CV<8%,批間 CV<10.8%
注意事項:用于血清抗體檢測前確認樣本無微生物污染;陽性樣本分區(qū)操作
關鍵注意事項:
實驗前需仔細閱讀對應試劑盒的說明書,不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現(xiàn)假陽性結果
顯色過程需避光,避免陽光直射影響結果
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實驗操作流程:
酶標板室溫平衡 31min,陽性標準品梯度稀釋,鼻咽拭子洗脫液離心后上樣。
各孔加樣 100μL,空白孔添加稀釋液,同步加入酶偶聯(lián)檢測抗體 60μL 覆膜。
室溫避光孵育 83min。
洗板 6 次,每輪浸泡 36s,強力拍干微孔內(nèi)液體。
加入顯色工作液 100μL,37℃遮光顯色 12min。
終止液終止顯色并震蕩混勻。
酶標儀檢測 OD 值,對照臨界值判讀陰陽性并定量毒素含量。
關鍵字: 人百日咳毒素;PT;ELISA試劑盒;
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