本試劑盒依托抗原抗體特異性免疫反應(yīng)與酶催化顯色原理，微孔板包被人泛素激活酶(E1/UBAE)特異性捕獲抗體，樣本中的E1/UBAE抗原與固相抗體結(jié)合后，與酶標(biāo)檢測(cè)抗體形成夾心免疫復(fù)合物，經(jīng)洗滌純化、底物顯色及終止反應(yīng)后，檢測(cè)吸光度數(shù)值，即可定量測(cè)定樣本中人泛素激活酶的濃度。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA試劑盒
英文名稱：E1/UBAE Elisa Kit
貨號(hào)：Y-E3071
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最小可測(cè) 0.13ng/mL
檢測(cè)范圍：0.5ng/mL - 40ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：樣本結(jié)合 90min，二抗孵育 50min，避光顯色 21min
顯色系統(tǒng)：OPD 底物顯色，避光反應(yīng)后終止
檢測(cè)波長(zhǎng)：492nm，參考 630nm
特異性：精準(zhǔn)識(shí)別 UBAE E1 活化酶，不結(jié)合泛素結(jié)合、連接酶組分
重復(fù)性：板內(nèi) CV≤6.6%，板間 CV≤8.8%
注意事項(xiàng)：樣本不可高溫滅活，會(huì)直接破壞 E1 蛋白構(gòu)象導(dǎo)致結(jié)果偏低
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光，避免陽光直射影響結(jié)果
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
試劑盒試劑室溫平衡 38min，稀釋洗滌工作液，逐級(jí)稀釋 E1 標(biāo)準(zhǔn)品，標(biāo)記空白、標(biāo)準(zhǔn)、樣本孔位置。
每孔加入標(biāo)準(zhǔn)品 / 樣本 / 稀釋液 50μL，立刻加入一步法酶標(biāo)記工作液 100μL，封板密封。
37℃避光孵育 70min，不可挪動(dòng)酶標(biāo)板位置。
棄除廢液，洗滌液浸泡每孔 32s，倒扣拍干，重復(fù)洗板 4 次。
每孔加入 TMB 顯色液 100μL，避光 37℃顯色 15min。
每孔加入終止液 50μL，輕搖混勻終止顯色。
15min 內(nèi) 450nm 讀值，計(jì)算樣本中 E1/UBAE 濃度。
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關(guān)鍵字： 人泛素激活酶;E1/UBAE;ELISA試劑盒;
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