本試劑盒依托雙抗體夾心ELISA檢測技術(shù)，微孔板包被人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α特異性捕獲抗體，待測樣本中的MIP-1α抗原可與固相抗體特異性結(jié)合；孵育洗滌去除雜質(zhì)后，加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的對應(yīng)檢測抗體，形成完整的免疫夾心復(fù)合物；通過酶促顯色反應(yīng)產(chǎn)生有色產(chǎn)物，吸光度值與樣本中MIP-1α含量正相關(guān)，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線可定量測定樣本中該炎性蛋白的濃度。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒
英文名稱：MIP-1α Elisa Kit
貨號：Y-E128
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：檢出限 0.4pg/mL
檢測范圍：0.8~51.2pg/mL
反應(yīng)時間：溫育 102min，酶標(biāo)記物 60min，避光顯色 20min
保存條件：2~8℃密封儲存，標(biāo)準(zhǔn)品溶解后建議分裝凍存
顯色系統(tǒng)：HRP 催化 TMB 顯色，酸性終止液終止
檢測波長：450nm，630nm 扣除孔底背景
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：四參數(shù) Logistic 回歸繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，軟件自動計算樣本細(xì)胞因子濃度
注意事項(xiàng)：炎癥樣本避免反復(fù)凍融；每塊板必須配套標(biāo)準(zhǔn)曲線；洗板次數(shù)不少于 6 次
儲存與有效期：
未開封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個月。
開封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個月內(nèi)使用。
過期試劑禁止使用。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
試劑常溫回溫 26min，拆分酶標(biāo)板，排布標(biāo)準(zhǔn)孔、樣品孔、空白孔，每孔加入待測稀釋液 100μL，空白孔補(bǔ)稀釋液。
直接添加酶標(biāo)記抗體工作液 60μL，震蕩混勻覆膜密封。
37℃避光孵育 57min，避免強(qiáng)光接觸底物。
開封棄凈廢液，洗滌液加滿每孔靜置 35s 后拍干，循環(huán)洗板 4 次。
加入顯色 A、B 液各 50μL，暗處 37℃顯色 12min。
滴入終止液 50μL 混勻終止反應(yīng)。
450nm 檢測吸光度，對照標(biāo)準(zhǔn)曲線計算 MIP-1α 含量。
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關(guān)鍵字： 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α;MIP-1α/CCL3;ELISA試劑盒;
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