本試劑盒基于雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附原理,微孔板包被人間變性淋巴瘤激酶特異性捕獲抗體,待測樣本中的ALK抗原可與固相抗體高效特異性結(jié)合;孵育結(jié)束后洗滌去除游離雜質(zhì),加入酶標(biāo)記ALK檢測抗體,形成完整的免疫夾心復(fù)合物;再次洗滌后加入顯色底物,在過氧化物酶催化下產(chǎn)生顯色反應(yīng),顯色深淺對應(yīng)樣本中ALK的含量,通過檢測吸光度并對照標(biāo)準(zhǔn)曲線,即可定量檢測樣本中間變性淋巴瘤激酶的濃度。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 人間變性淋巴瘤激酶(ALK)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E3057 |
英文名稱 | ALK Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最小檢出量 0.06ng/mL
檢測范圍:0.125~8ng/mL
反應(yīng)時間:抗原抗體結(jié)合 100min,酶二抗 60min,避光顯色 20min
保存條件:整套試劑 2~8℃避光保存,禁止冷凍包被板
顯色系統(tǒng):穩(wěn)定型單液 TMB 顯色體系
檢測波長:450nm 為主,650nm 扣除背景
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:線性回歸法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù) OD 值直接換算樣本 ALK 蛋白濃度
注意事項:細(xì)胞上清樣本去除細(xì)胞沉淀;孵育全程密封防止液體蒸發(fā);終止后立即上機(jī)讀數(shù)
關(guān)鍵注意事項:
實驗前需仔細(xì)閱讀對應(yīng)試劑盒的說明書,不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光,避免陽光直射影響結(jié)果
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實驗操作流程:
試劑盒室溫平衡 30min,取出酶標(biāo)板條,設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔、空白對照孔,每孔加入稀釋后樣本 100μL,空白孔加稀釋液。
直接添加酶結(jié)合工作液 50μL 至所有孔位,混勻后封板密封。
37℃孵育 60min,單層放置酶標(biāo)板,不可堆疊。
去除封膜棄凈液體,每孔加滿洗滌液浸泡 30s,甩干,洗板 5 次后徹底拍干。
每孔加入顯色底物 A、B 各 50μL,避光 37℃顯色 15min。
每孔加入終止液 50μL 混勻,終止顯色。
450nm 檢測吸光度,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,定量樣本 ALK 表達(dá)量。
關(guān)鍵字: 人間變性淋巴瘤激酶;ALK;ELISA試劑盒;
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