本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA技術，微孔板固相包被人視網膜母細胞瘤抑制蛋白(pRB)特異性抗體，檢測過程中，樣本與標準品中的pRB抗原與固相抗體精準結合，孵育洗滌后加入酶標記配對抗體，形成穩(wěn)定免疫復合物，經酶促顯色、終止反應后，通過酶標儀檢測吸光度，數值高低對應樣本中pRB的表達濃度，結合標準曲線完成定量分析。
基本參數?：
產品名稱：人視網膜母細胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA試劑盒
英文名稱：pRB Elisa Kit
貨號：Y-E280
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最小檢出 0.35ng/mL
檢測范圍：2.2ng/mL ~ 800ng/mL
反應時間：樣本孵育 74min，二抗溫育 52min，避光顯色 19min，總時長 2h25min
保存條件：整套試劑 2～8℃冷藏，洗滌液室溫儲存，終止液不可低溫存放避免結晶
顯色系統(tǒng)：單組分 TMB 顯色底物，1M 硫酸終止
檢測波長：僅 450nm 檢測 OD 值
標準曲線繪制：線性回歸法構建標準曲線，6 個濃度梯度點
注意事項：腫瘤組織樣本勻漿后務必離心去除大塊組織殘渣；操作臺面避免強光直射試劑盒
關鍵注意事項：
實驗前需仔細閱讀對應試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽性結果
顯色過程需避光，避免陽光直射影響結果
實驗步驟如下：
試劑盒組分室溫平衡 23min，稀釋洗滌緩沖液，逐級稀釋 pRB 標準品，取用實驗板條。
標準孔加 50μL 梯度 pRB 標準溶液；樣本孔加 50μL 稀釋液 + 10μL 樣本；空白孔不加液體。
檢測孔加入 HRP 標記抗 pRB 抗體 100μL，封板 37℃孵育 53min。
棄液后洗滌液加滿每孔靜置 30s，甩干洗板 4 次，拍干微孔板。
顯色 A、B 液各 50μL，混勻避光顯色 13min。
加入終止液 50μL 混勻終止顯色。
450nm 測吸光度，標準曲線計算 pRB 含量。
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關鍵字： 人視網膜母細胞瘤抑制蛋白;pRB;ELISA試劑盒;
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