本試劑盒依托間接ELISA檢測(cè)原理,微孔板包被中性粒細(xì)胞胞漿特異性抗原,待測(cè)樣本中的胞漿型抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(cANCA)與固相抗原特異性結(jié)合,洗板去除未結(jié)合物質(zhì)后,加入酶標(biāo)記抗人免疫球蛋白抗體,催化底物顯色,吸光度值與樣本中cANCA抗體含量正相關(guān),可實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 人抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(cANCA)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E513 |
英文名稱 | cANCA Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:檢出下限 0.8 RU/mL
檢測(cè)范圍:0.625 RU/mL ~ 40 RU/mL
反應(yīng)時(shí)間:樣本溫育 90min,酶結(jié)合物 55min,顯色 21min
保存條件:2~8℃避光保存,洗滌液稀釋后可 2~25℃放置 7 天
顯色系統(tǒng):雙組份 TMB 顯色液
檢測(cè)波長:450nm/630nm 雙波長讀數(shù)
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:梯度標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)定吸光度,非線性回歸構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線
注意事項(xiàng):抗凝血漿優(yōu)先選用 EDTA 抗凝,肝素抗凝易產(chǎn)生干擾
關(guān)鍵注意事項(xiàng):
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說明書,不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光,避免陽光直射影響結(jié)果
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實(shí)驗(yàn)操作流程:
全部試劑室溫放置 29min,取用酶標(biāo)板條,標(biāo)注各類實(shí)驗(yàn)孔位。
各孔加入預(yù)處理待測(cè)樣本或梯度標(biāo)準(zhǔn)品 50μL,緊接著加入酶結(jié)合液 50μL,覆膜封板。
手動(dòng)搖勻,37℃孵育 61min。
去除封膜,洗板液加滿浸泡 31s,拍干,循環(huán)洗板 5 次。
顯色底物 A、B 各 50μL / 孔,避光 37℃顯色 16min。
滴入終止液 50μL,輕板混勻終止。
450nm 波長檢測(cè)吸光度,定量 cANCA 抗體數(shù)值。
關(guān)鍵字: 人抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體;cANCA;ELISA試劑盒;
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