本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測(cè)技術(shù)，酶標(biāo)板預(yù)包被MAdCAM-1特異性單克隆抗體，待測(cè)樣本中的黏膜地址素細(xì)胞黏附分子與固相抗體特異性結(jié)合，加入酶標(biāo)記檢測(cè)抗體形成穩(wěn)定夾心復(fù)合物，洗滌去除非特異性結(jié)合雜質(zhì)后進(jìn)行酶促顯色，顯色強(qiáng)度對(duì)應(yīng)靶蛋白濃度，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線換算完成定量檢測(cè)。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人黏膜地址素細(xì)胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E023 |
英文名稱 | MAdCAM-1 Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：0.58 ng/L
檢測(cè)范圍：5ng/L～330ng/L
反應(yīng)時(shí)間：封閉 32min，樣本 86min，二抗 47min，顯色 15min，總 180min
保存條件：未開封 2-8℃，開封后 2 個(gè)月內(nèi)用完試劑盒
顯色系統(tǒng)：A/B 底物混合后顯色
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm 單波長(zhǎng)讀數(shù)
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：6 點(diǎn)梯度，線性回歸繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線
注意事項(xiàng)：細(xì)胞培養(yǎng)上清需去除懸浮細(xì)胞沉淀再上樣
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測(cè)依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
準(zhǔn)備工作：試劑盒組分室溫回溫，稀釋濃縮洗滌液，梯度稀釋 MAdCAM-1 標(biāo)準(zhǔn)品。
微孔加樣：標(biāo)準(zhǔn)孔、樣本孔、空白孔分別加樣 100μL，標(biāo)記孔位信息。
一步共孵加酶抗：每孔加入酶標(biāo)特異性抗體 100μL，封板輕搖酶標(biāo)板。
恒溫孵育：37℃避光孵育 59min。
洗板去污：倒掉廢液，洗液浸泡 25s 拍干，洗板 4 次。
避光顯色：加入顯色 A、B 液各 50μL，顯色 16min。
終止定量：終止液終止反應(yīng)，450nm 測(cè)定 OD 值，定量 MAdCAM-1 表達(dá)量。
關(guān)鍵字： 人黏膜地址素細(xì)胞黏附分子;MAdCAM-1;ELISA試劑盒;
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