本試劑盒依托雙抗體夾心ELISA檢測原理，將高特異性的人GlyCAM-1抗體包被于酶標板表面，待測樣本中的GlyCAM-1分子可與固相抗體特異性結合，經(jīng)洗板去除非特異性結合物，加入酶標記配對抗體形成穩(wěn)定的三元免疫復合物，催化底物顯色后，顏色強度與樣本中GlyCAM-1含量呈正比，通過酶標儀檢測吸光度，結合標準曲線即可定量檢測樣本中該黏附分子的表達水平。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：人糖基化依賴的細胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA試劑盒

英文名稱：GlyCAM-1   Elisa Kit
貨號：Y-E016

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低可測 0.07ng/mL

檢測范圍：0.13～11ng/mL

反應時間：封閉 35min，樣本 37℃孵育 95min，二抗 50min，顯色 14min

保存條件：包被板條帶干燥劑密封 2～8℃，其余試劑同溫保存

顯色系統(tǒng)：A 液顯色基質 + B 液催化液雙組份顯色

檢測波長：450nm 為主，620nm 扣除背景

標準曲線繪制：采用四參數(shù) Logistic 模型擬合，強制原點校正基線

注意事項：洗板每孔浸泡 30s 再拍干，洗滌不充分會造成本底偏高
實驗前準備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標板、標準品、酶結合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標簽標注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標準品復溶 / 梯度稀釋：

凍干標準品加入配套標準品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個濃度梯度標準品，單獨標記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復凍融。

待測樣本預處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細胞上清用樣本稀釋液適當稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴重樣本棄用。

2. 耗材與設備準備

設備：恒溫 37℃孵育箱、酶標儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機（或手動洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準。

取出本次實驗所需酶標板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標記

酶標板做好分區(qū)標記：空白孔、零標準孔、梯度標準品孔、待測樣本孔、復孔（所有樣本、標準品建議設置雙復孔降低誤差）。
實驗步驟如下：

試劑盒室溫回溫 32min，取出 GlyCAM-1 捕獲抗體包被板，棄凈孔內(nèi)液體，洗板 1 次后拍干微孔。

區(qū)分空白孔、標準品孔、待測樣本孔；標準品孔添加梯度標準品 60μL，樣本孔加入細胞上清稀釋液 60μL，空白孔補稀釋緩沖液。

每孔加入 HRP 標記二抗 60μL，封板密封，37℃濕盒孵育 75min。

去封板，傾倒廢液，洗滌液浸泡每孔 40s 棄除，連續(xù)洗板 5 次，倒置拍干。

配制顯色工作液每孔加 100μL，37℃避光顯色 13min。

每孔加注終止液 50μL，震蕩混勻終止顯色。

酶標儀 450nm 測 OD 值，擬合標準曲線定量 GlyCAM-1 表達量。
公司正在出售的產(chǎn)品：