本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測原理,以微孔板為固相載體包被該RIKEN基因編碼蛋白的特異性抗體,樣本中靶蛋白與固相抗體特異性結(jié)合,隨后結(jié)合HRP標記的檢測抗體形成夾心復合物,去除游離雜質(zhì)后進行底物顯色,顯色程度與樣本中靶蛋白濃度正相關(guān),通過酶標儀讀數(shù)及標準曲線計算,可定量檢測樣本中該基因編碼蛋白的含量。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 人類似RIKEN cDNA 2010109K09 基因 ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E2585 |
英文名稱 | RIKEN cDNA ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:檢測下限≤0.07ng/mL
檢測范圍:0.3ng/mL–18ng/mL
反應(yīng)時間:全程 37℃反應(yīng)總時長 135min
保存條件:試劑盒整體 2–8℃,底物液必須避光單獨存放
顯色系統(tǒng):ABTS 顯色體系
檢測波長:405nm
標準曲線繪制:采用對數(shù)擬合繪制標準曲線
注意事項:避免強光直射底物;樣本稀釋比例嚴格按照說明書配比
關(guān)鍵注意事項:
實驗前需仔細閱讀對應(yīng)試劑盒的說明書,不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光,避免陽光直射影響結(jié)果
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實驗操作流程:
樣本前處理:核酸蛋白提取上清樣本低溫離心去除沉淀,用樣本稀釋液梯度稀釋;
微孔加樣:預(yù)包被板每孔加入標準品、待測樣本 100μL,空白孔加入等量稀釋液;
共孵結(jié)合:直接加入酶標二抗工作液,覆膜封板,37℃恒溫孵育 55min;
洗板凈化:傾倒廢液,洗滌液浸泡每孔 28s,拍干,重復洗板 5 次;
避光顯色:每孔加入顯色 A、B 液各 50μL,避光孵育 14min;
終止操作:每孔添加終止液 50μL,震蕩混勻終止顯色;
讀數(shù)定量:450nm 波長酶標儀讀數(shù),繪制標準曲線換算樣本靶標濃度。
關(guān)鍵字: 人類似RIKEN cDNA ;2010109K09 基因 ;ELISA試劑盒;
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