本試劑盒采用間接ELISA檢測原理，微孔板固相包被流行性腮腺炎病毒特異性抗原，樣本中的人流行性腮腺炎病毒抗體可與抗原特異性結(jié)合，洗板后加入酶標記二抗進行反應，底物顯色后根據(jù)吸光度數(shù)值，結(jié)合標準曲線定量檢測樣本中EP病毒抗體的含量。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：IgM 抗體最低檢出稀釋度 1:20

檢測范圍：抗體相對含量 0–120AU/mL

反應時間：37℃孵育總時長 122min

保存條件：試劑盒 2~8℃，洗滌液稀釋后常溫可放置 3 天

顯色系統(tǒng)：單組份 TMB 顯色液

檢測波長：450/630nm

標準曲線繪制：陰陽性對照結(jié)合校準品繪制判定曲線

注意事項：腮腺炎急性期采血最佳，恢復期樣本抗體水平會升高
通用注意事項：

樣本要求

血清、血漿避免嚴重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復凍融≥3 次會導致抗原降解，檢測值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴格 37℃，溫箱溫度波動、室溫過低會降低結(jié)合效率，背景升高、重復性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會造成高背景、假陽性；拍干時使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實驗耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標準品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實驗廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標準品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實驗。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標準孔時，必須稀釋重測，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測限標注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對照

空白孔吸光度應極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實驗作廢重做。

儲存禁忌

試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會造成酶標抗體蛋白變性，直接導致試劑盒完全失效。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實驗操作流程：

樣本預處理：血清樣本常溫融化，去除脂血雜質(zhì)后稀釋；

加樣布設：每孔加入標準品、待測血清樣本 100μL；

一步免疫孵育：直接加入酶標記抗原工作液，37℃密封孵育 72min；

洗板除雜：洗滌液浸泡 34s，拍干，洗板 6 次；

顯色孵育：避光加入顯色液 20min；

終止反應：滴加終止液終止顯色；

檢測判讀：酶標儀讀數(shù)判定腮腺炎抗體陽性 / 陰性。