本試劑盒基于特異性夾心酶聯免疫吸附原理,酶標板預先包被抗人AOPP特異性抗體,樣本中的晚期氧化蛋白產物可與固相抗體高效特異性結合,洗滌去除非特異性結合組分后,加入酶標記二抗構建免疫復合物,經二次洗板后啟動底物顯色反應,顯色強度與樣本AOPP含量成正比,通過吸光度檢測與標準曲線擬合,完成樣本AOPP的定量檢測。
基本參數?:

產品名稱:人晚期氧化蛋白產物(AOPP)ELISA試劑盒
英文名稱:AOPP ELISA Kit
貨號:Y-E2902
規(guī)格:48T/96T
靈敏度:≤0.1μmol/L
檢測范圍:0.2~25μmol/L
反應時間:樣本孵育 68min,二抗 44min,避光顯色 20min
保存條件:試劑盒 2~8℃冷藏,終止液常溫存放即可
顯色系統(tǒng):改良增強型 TMB 顯色體系
檢測波長:450nm 單波長測定吸光度
標準曲線繪制:六組標品梯度,軟件自動生成擬合曲線
注意事項:避免樣本接觸氧化劑,會人為提升 AOPP 檢測數值
關鍵注意事項:

實驗前需仔細閱讀對應試劑盒的說明書,不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現假陽性結果
顯色過程需避光,避免陽光直射影響結果
實驗步驟如下:

試劑盒室溫回溫 29min,AOPP 抗體包被板去除孔內液體,洗滌液清洗微孔 2 次,拍干備用。
排布孔位:空白孔、梯度標準孔、血漿待測樣本孔;標準品孔加入 AOPP 標準品 55μL,樣本孔加入稀釋血漿 55μL,空白孔加稀釋液。
每孔加入 HRP 標記檢測抗體 55μL,封板密封,37℃孵育 68min。
掀開封板膜,倒掉孔內液體,洗滌液浸泡每孔 40s 棄液,連續(xù)洗板 5 次,倒置拍干。
每孔加入顯色底物液 100μL,遮光條件下顯色 15min。
滴加終止液 50μL 終止顯色反應,震蕩混勻。
450nm 波長讀數,依據標準曲線計算 AOPP 水平。
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關鍵字: 人晚期氧化蛋白產物;AOPP;ELISA試劑盒;
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