本試劑盒運用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測原理,酶標板固定抗人CpG-ODN特異性抗體,加入待測樣本后,樣本中的未甲基化寡聚脫氧核苷酸與固相抗體特異性結(jié)合,洗滌純化反應(yīng)體系,加入酶標記二抗形成免疫復(fù)合物,洗除游離標記物后加入底物顯色,終止反應(yīng)后檢測吸光度,依據(jù)標準曲線精準定量樣本中CpG-ODN的含量。
基本參數(shù)?:

產(chǎn)品名稱:人未甲基化寡聚脫氧核苷酸(CpG-ODN)ELISA試劑盒
英文名稱:CpG-ODN ELISA Kit
貨號:Y-E2618
規(guī)格:48T/96T
靈敏度:≤0.18nmol/L
檢測范圍:0.3~22nmol/L
反應(yīng)時間:樣本孵育 95min,酶結(jié)合物 65min,顯色 24min
保存條件:試劑盒 2~8℃,濃縮洗滌液室溫可放置 2 個月
顯色系統(tǒng):酸性終止 TMB 顯色體系
檢測波長:450nm 單波長讀數(shù)
標準曲線繪制:線性擬合標準曲線,低濃度樣本放大讀數(shù)計算
注意事項:實驗耗材無 DNase/RNase 污染,防止核酸模板降解
關(guān)鍵注意事項:

實驗前需仔細閱讀對應(yīng)試劑盒的說明書,不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光,避免陽光直射影響結(jié)果
實驗步驟如下:

試劑盒室溫平衡 32min,CpG-ODN 特異性包被板棄封存液,洗板 2 次后拍干微孔殘留液體。
劃分孔位:空白孔、倍比標準品孔、細胞上清樣本孔;標準品孔加入 CpG-ODN 標準品 50μL,樣本孔加入稀釋待測液 50μL,空白孔補稀釋液。
每孔加入酶標二抗 50μL,封板密封,37℃孵育 68min。
掀開封板膜,傾倒廢液,洗滌液浸泡每孔 30s 棄除,洗板 6 次,徹底拍干。
每孔添加顯色底物液 100μL,避光 37℃顯色 15min。
滴加終止液 50μL 混勻終止顯色反應(yīng)。
酶標儀 450nm 讀數(shù),標準曲線定量 CpG-ODN 含量。
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關(guān)鍵字: 人未甲基化寡聚脫氧核苷酸;CpG-ODN;ELISA試劑盒;
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