本試劑盒基于酶聯(lián)免疫吸附特異性檢測原理,將Irna特異性抗體固定于酶標板微孔表面,加入待測樣本與標準品后,樣本中的免疫核糖核酸與固相抗體發(fā)生特異性免疫結(jié)合,后續(xù)加入酶標記二抗形成穩(wěn)定夾心復合物,經(jīng)洗滌純化后進行底物顯色,終止反應(yīng)后檢測吸光度,結(jié)合標準曲線即可定量測定樣本中Irna的濃度。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 人免疫核糖核酸(Irna)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E2653 |
英文名稱 | Irna ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最低檢出 3.6 μg/mL
檢測范圍:10μg/mL~600μg/mL
反應(yīng)時間:室溫孵育 100min,酶結(jié)合物 35min,顯色 22min,總 157min
保存條件:試劑盒 2-8℃,RNA 類組分避免反復凍融,建議單次分裝使用
顯色系統(tǒng):OPD 顯色底物,硫酸終止
檢測波長:492nm 單波長檢測
標準曲線繪制:5 個濃度梯度,線性方程擬合,舍去異常復孔
注意事項:操作臺面無 RNase 污染,樣本避免高溫處理降解靶標物質(zhì)
關(guān)鍵注意事項:
本試劑盒僅科研體外檢測,嚴禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強光直射,TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用,杜絕交叉污染;所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴格控制 37℃,溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分,殘液會造成非特異性結(jié)合,背景偏高。
終止后需快速讀數(shù),放置過久吸光度會漂移,結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸,避免接觸皮膚、眼睛,若不慎接觸大量清水沖洗。
實驗廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運輸全程 2~8℃冷鏈,嚴禁高溫暴曬。
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實驗操作流程:
試劑平衡:試劑盒全部試劑室溫放置 30min,稀釋濃縮洗液,梯度稀釋 Irna 標準品。
加樣上板:酶標板每孔加入標準品、待測樣本、空白對照液 100μL,緩慢加樣防止濺孔。
酶標抗體加入:每孔添加酶標記 Irna 抗體 100μL,封板后輕搖混勻。
恒溫孵育:37℃孵育 55min,避光環(huán)境下進行免疫結(jié)合反應(yīng)。
洗板操作:傾倒廢液,洗滌液加滿微孔,浸泡 25s 后拍干,洗板 4 次。
顯色孵育:加入顯色工作液 100μL,暗處顯色 13min。
終止讀數(shù):終止液終止顯色,酶標儀 450nm 讀取 OD 值,繪制標準曲線定量 Irna。
關(guān)鍵字: 人免疫核糖核酸;Irna;ELISA試劑盒;
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