?產(chǎn)品名稱:傘枝梨頭霉PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Absidia corymbiferaPCR
貨號(hào):YS-P013769
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
規(guī)格?:50T/盒
檢測(cè)原理:
提取樣本中傘枝梨頭霉特異性基因組 DNA,試劑盒引物僅匹配該霉菌特有保守基因片段,不結(jié)合其他真菌核酸。
以提取真菌 DNA 為模板,Taq 酶介導(dǎo)特異性片段指數(shù)級(jí)擴(kuò)增,僅傘枝梨頭霉核酸可產(chǎn)生目標(biāo)長(zhǎng)度擴(kuò)增產(chǎn)物。
通過(guò)熒光信號(hào) / 瓊脂糖電泳判讀擴(kuò)增產(chǎn)物,出現(xiàn)特異性條帶或熒光曲線即判定樣本存在傘枝梨頭霉。
實(shí)驗(yàn)流程:
樣本處理(樣本處理區(qū))
推薦使用磁珠法或離心柱法提取核酸,避免交叉污染。
試劑配制(試劑準(zhǔn)備區(qū))
反應(yīng)體系(20μL/管):19μL反應(yīng)液 + 1μL酶液,分裝后加入5μL待測(cè)核酸或質(zhì)控品。
PCR擴(kuò)增(核酸擴(kuò)增區(qū))
循環(huán)參數(shù):
預(yù)變性:95℃ 2min(1循環(huán));
擴(kuò)增:95℃ 15sec → 60℃ 30sec(45循環(huán),60℃時(shí)采集熒光信號(hào),F(xiàn)AM通道)。
結(jié)果分析
陽(yáng)性:Ct值≤40,擴(kuò)增曲線呈指數(shù)增長(zhǎng);
陰性:無(wú)Ct值或曲線平直;
可疑:40<Ct≤45,需復(fù)測(cè)確認(rèn)。
質(zhì)控要求:陽(yáng)性質(zhì)控Ct≤32,陰性質(zhì)控?zé)o擴(kuò)增。
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注意事項(xiàng):
所有試劑避免反復(fù)凍融,可分裝小體積凍存;融化后冰上放置不超過(guò) 2 h,酶失活會(huì)直接導(dǎo)致無(wú)擴(kuò)增條帶
陽(yáng)性質(zhì)??截悢?shù)極高,開(kāi)蓋全程在生物安全柜操作,防止氣溶膠污染實(shí)驗(yàn)室
所有耗材必須無(wú)核酸酶,槍頭一次性使用;實(shí)驗(yàn)后 PCR 管、廢液 121℃高壓滅菌后丟棄
試劑盒出現(xiàn)渾濁、變色、結(jié)冰分層、過(guò)期禁止使用
僅限科研檢測(cè),嚴(yán)禁用于人體臨床疾病診斷、食品出廠檢疫等合規(guī)檢測(cè)場(chǎng)景
土壤、糞便、腐殖質(zhì)樣本優(yōu)先使用磁珠法提取核酸,減少抑制劑干擾
關(guān)鍵字: 傘枝梨頭霉;PCR檢測(cè)試劑盒;
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