背景[1-3]
APC標(biāo)記小鼠抗人CD3單克隆抗體是一類可以特異性結(jié)合人CD3的小鼠單克隆抗體，主要用于檢測(cè)人CD3的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多種免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)。
檢測(cè)原理：雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人CD3水平。用純化的人CD3抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入人CD3，再與HRP標(biāo)記的人CD3抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人CD3呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人CD3濃度。
在免疫學(xué)中，CD3（分化簇3）T細(xì)胞的共受體是一種蛋白質(zhì)復(fù)合物，它由四個(gè)不同的鏈組成。在哺乳動(dòng)物中，該復(fù)合物含有一個(gè)CD3γ鏈，CD3δ鏈，和2 CD3ε鏈。這些鏈具有被稱為一個(gè)分子副T細(xì)胞受體（TCR）和ζ-鏈以產(chǎn)生激活信號(hào)的T淋巴細(xì)胞。該TCR，ζ鏈和CD3分子一起構(gòu)成的T細(xì)胞受體復(fù)合物。
APC基因是一個(gè)很大的管家基因（housekeeping gene）,全長(zhǎng)含有一個(gè)8538 bp的開(kāi)放式可讀框架，共15個(gè)外顯子，6個(gè)可變地表達(dá).其中第15外顯子獨(dú)自含有6571個(gè)bp，組成77%的編碼區(qū)，是人類已知的外顯子，它共編碼2843個(gè)氨基酸.轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA分子為8.9 kb,在很多細(xì)胞和組織中均有表達(dá).。
應(yīng)用[4][5]
用于CD3、Ki-67和Bcl-2在宮頸癌中的表達(dá)及臨床意義研究
對(duì)CD3、Ki-67和Bcl-2在不同宮頸組織中的表達(dá)以及三者與宮頸癌臨床病理特征之間關(guān)系的研究,探討三者在宮頸癌發(fā)生發(fā)展中的作用及意義,為宮頸癌的診斷及分子靶向治療提供理論依據(jù)。方法:1.收集病理確診的不同宮頸組織標(biāo)本118例(正常宮頸組織27例、CIN I組織12例、CIN II-III組織28例、宮頸癌組織51例)。
2. 入選標(biāo)本患者術(shù)前均未接受放化療及生物學(xué)治療,無(wú)合并免疫系統(tǒng)相關(guān)疾病。
3. 采用免疫組化法檢測(cè)正常宮頸組織、CIN I組織、CIN II-III組織及宮頸癌組織中CD3、Ki-67和Bcl-2的表達(dá),應(yīng)用SPSS17.0軟件包對(duì)所得結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
結(jié)果:1.CD3陽(yáng)性表達(dá)率隨宮頸病變加重而下降,在正常宮頸組織、CIN I組織、CIN II-III組織、宮頸癌組織中表達(dá)率為96.3%、75%、57.1%、37.2%,四組間比較,有顯著性差異(P<0.05);其中正常宮頸組織分別與CIN I、CIN II-III、宮頸癌組織比較,有顯著性差異(P<0.05);CIN I與宮頸癌組織比較,有顯著性差異(P<0.05);但CIN II-III與CIN I、宮頸癌組織比較,無(wú)顯著性差異(P>0.05)。
CD3陽(yáng)性表達(dá)率與FIGO分期、有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)(P<0.05),與患者年齡、組織學(xué)類型、病理分級(jí)無(wú)關(guān)(P>0.05)。
2.Ki-67在正常宮頸組織、CIN I組織、CIN II-III組織和宮頸癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率依次遞增,分別為3.7%、16.7%、53.6%、86.3%,四組間比較,有顯著性差異(P<0.05);分別進(jìn)行兩兩比較,正常宮頸組織與CIN II-III、宮頸癌組織比較,CIN I與CIN II-III、宮頸癌組織比較,CIN II-III與宮頸癌組織比較,均有顯著性差異(P<0.05);但正常宮頸組織與CIN I組織比較,無(wú)顯著性差異(P>0.05)。
參考文獻(xiàn)
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