帕金森?。≒D）作為一種神經(jīng)運動疾病，往往伴隨著運動和非運動障礙，嚴重影響人類的老年生活。最近研究表明，在神經(jīng)元細胞和神經(jīng)膠質(zhì)細胞中，PD與失調(diào)的自噬系統(tǒng)和大腦炎癥有關。氯喹（CQ）是一種抗瘧疾藥物，已被證明可在包括腦缺血、阿爾茨海默?。ˋD）和創(chuàng)傷性腦損傷（TBI）在內(nèi)多種疾病中抑制自噬，但其在帕金森病中的作用尚不清楚。

在此背景下，2023年1月30日，印度喬治國王醫(yī)科大學藥理學和治療學系Rishi Pal課題組在Inflammopharmacology發(fā)文揭示了氯喹通過調(diào)節(jié)自噬和神經(jīng)炎癥改善MPTP誘導的帕金森病。

首先，為了評估自噬損傷和炎癥信號傳導之間的聯(lián)系，課題組測量了PC12細胞中的細胞活力和ROS含量，WB和免疫染色結(jié)果顯示：PC12細胞在經(jīng)MPTP誘導后TH(酪氨酸羥化酶，多巴胺合成的限速酶)的表達顯著下降，LC3B（自噬標記物）的表達顯著上調(diào)。此外，課題組采用甲基噻唑基四唑（MTT）法測定細胞活力，發(fā)現(xiàn)氯喹逆轉(zhuǎn)了MPTP誘導的PC12細胞的細胞活力的下降和胞內(nèi)ROS（活性氧）強度的過度增加。這些結(jié)果表明氯喹緩解了MPTP誘導的細胞自噬損傷。

圖1|PC12細胞中的細胞活力和ROS含量測定結(jié)果

行為學測試結(jié)果顯示：MPTP誘導的PD小鼠在曠場中行走和后腿直立的時間及移速都顯著降低；其進入高架十字迷宮中開放臂內(nèi)的時間和次數(shù)減少；其在加速旋轉(zhuǎn)測試中跌落得更快，表現(xiàn)出身體協(xié)調(diào)缺陷；此外，其握力也顯著下降，表現(xiàn)出身體機能的退化；而氯喹緩解了MPTP誘導的這些行為學異常的PD表型。

圖2|行為學測試結(jié)果

過去研究認為帕金森病的致病機制與抗氧化系統(tǒng)和自由基形成的失衡導致的氧化應激誘導的炎癥反應有關。課題組進一步研究發(fā)現(xiàn)：MPTP增加了小鼠腦組織內(nèi)脂質(zhì)過氧化（MDA）的水平，并顯著降低了SOD、過氧化氫酶和谷胱甘肽活性，而用CQ處理可產(chǎn)生保護性反應，使上述抗氧化酶的水平顯著升高，降低MDA水平。

圖3|CQ緩解了MPTP誘導的PD小鼠的氧化應激

H&E染色顯示：MPTP誘導的PD小鼠紋狀體腦區(qū)細胞質(zhì)空泡化、核收縮和扭曲，并存在破碎的細胞核，而CQ治療逆轉(zhuǎn)了PD小鼠紋狀體的細胞損傷。ELISA和高效液相色譜分析（HPLC）結(jié)果顯示：CQ治療降低了PD小鼠紋狀體炎癥因子（IL-1 β 和TNF-α）的積累，并恢復了其紋狀體多巴胺的表達水平。

圖4|H&E染色、HPLC和ELISA結(jié)果

進一步的免疫染色和WB結(jié)果證明CQ處理可以逆轉(zhuǎn)MPTP誘導的PD小鼠黑質(zhì)與紋狀體腦區(qū)內(nèi)TH、Beclin-1和LC3B的異常表達，緩解了這些腦區(qū)的細胞自噬損傷。

圖5|CQ緩解了PD小鼠紋狀體和黑質(zhì)腦區(qū)的細胞自噬損傷

總的來說，本文指出了在MPTP誘導的PD模型中，自噬和神經(jīng)炎癥信號失調(diào)的假定作用，發(fā)現(xiàn)CQ通過抑制促炎癥因子和氧化應激反應，同時緩解MPTP誘導的細胞自噬損傷、多巴胺能變性來發(fā)揮對PD的治療作用。

圖6|氯喹通過調(diào)節(jié)自噬和神經(jīng)炎癥在MPTP誘導的帕金森病發(fā)揮神經(jīng)保護作用