背景及概述[1]
腎小球系膜是位于腎小球毛細血管襻中軸中心部位的一種特殊間充質(zhì)組織,由間充質(zhì)細胞和充填于其間的系膜基質(zhì)所組成。由系膜細胞及系膜基質(zhì)組成,為腎小球毛細血管叢小葉間的軸心組織,并與毛細血管的內(nèi)皮直接相鄰。系膜細胞呈星形,有多個突起,有豐富的細胞質(zhì)。在單個系膜區(qū)系膜細胞不超過3個。系膜基質(zhì)由系膜細胞產(chǎn)生,是一種基質(zhì)樣物質(zhì),占腎小球面積的6.2%~10.4%,其中的間隙形成系膜通道,可將不能通過腎小球濾過膜的大分子物質(zhì)運至血管極排出。腎小球系膜有多種生理功能:
(1)對腎小球毛細血管袢有支持和保護作用;
(2)通過系膜的吞噬功能及系膜通道可將血漿大分子物質(zhì)轉(zhuǎn)運、清除;
(3)通過系膜細胞的收縮和舒張,控制毛細血管的血流量,調(diào)節(jié)腎小球的濾過功能及系膜通道功能;
(4)系膜細胞上具有Fc、C3b受體,可參與免疫反應;
(5)系膜細胞可釋放多種炎癥介質(zhì),通過自分泌及旁分泌途徑參與腎小球炎癥反應;
(6)系膜細胞可產(chǎn)生多種細胞外基質(zhì),參與基底膜的修復與更新,在病理情況下導致腎小球硬化。HBZY-1/大鼠腎小球系膜細胞EC(HBZY-1)常用于腎病發(fā)生機理的臨床研究,也可用于構(gòu)建動物摸型。
HBZY-1/大鼠腎小球系膜細胞EC(HBZY-1)傳代建議:1:2~1:3傳代,2~3天換液1次,細胞質(zhì)檢情況:不含細菌、真菌、支原體等微生物污染。HBZY-1/大鼠腎小球系膜細胞EC(HBZY-1)復蘇步驟如下:
1)把凍存管從液氮中取出來,立即投入37℃水浴鍋中,輕微搖動。液體都融化后(大概1-1.5分鐘),拿出來噴點酒精放到超凈工作臺里。
2)把上述細胞懸液吸到裝10ml培養(yǎng)基的15ml的離心管中(用培養(yǎng)基把凍存管洗一遍,把粘在壁上的細胞都洗下來),1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。
3)把上清液倒掉,加1ml培養(yǎng)基把細胞懸浮起來。吸到裝有10ml培養(yǎng)基的10cm培養(yǎng)皿中前后左右輕輕搖動,使培養(yǎng)皿中的細胞均勻分布。
4)標好細胞種類和日期、培養(yǎng)人名字等,放到CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),細胞貼壁后換培養(yǎng)基。5)3天換一次培養(yǎng)基。
HBZY-1/大鼠腎小球系膜細胞EC(HBZY-1)傳代步驟如下:
1)培養(yǎng)皿中的細胞覆蓋率達到80%-90%時要傳代。
2)把原有培養(yǎng)基吸掉。
3)加適當?shù)囊鹊鞍酌福芨采w細胞就行),消化1-2分鐘。
4)細胞都變圓后加如入等體積的含血清的培養(yǎng)基終止消化。
5)用移液槍吹打細胞,把細胞都懸浮起來。
6)把細胞吸到15ml的離心管中,1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。
7)倒掉上清液,加1-2ml培養(yǎng)基,把細胞都吹起來。
8)根據(jù)細胞種類把細胞傳到幾個培養(yǎng)皿中。一般,癌細胞分5個,正常細胞傳3個。繼續(xù)培養(yǎng)。
主要參考資料
[1] 內(nèi)科學·卷