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寬范圍彩色預(yù)染蛋白質(zhì)Marker的應(yīng)用

2020/2/13 10:55:29

背景及概述[1][2]

寬范圍彩色預(yù)染蛋白質(zhì)Marker包含 12 種預(yù)染的蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn),分子量范圍為 11-245 kDa,其中 75 kDa 蛋白條帶為紅色,25 kDa 蛋白條帶為綠色,其它蛋白條帶為藍(lán)色??赏ㄟ^此預(yù)染蛋白 Marker 直接觀察蛋白電泳及清晰地判斷 Western Blot 的轉(zhuǎn)移效果。儲(chǔ)存液成分:20 mM Tris-HCl (pH 7.5);1 mM Dithiothreitol; 15% glycerol;2% SDS;3.6 mM Urea。產(chǎn)品特點(diǎn):更好的條帶清晰度,雙彩色指示性條帶,易于分辨電泳方向及待測(cè)蛋白大小,分子量范圍寬,直接上樣更方便。

使用方法[1]

使用前請(qǐng)將寬范圍彩色預(yù)染蛋白質(zhì) Marker 置于室溫?cái)?shù)分鐘,徹底溶解并輕彈混勻后,無需加熱。如果在電泳中肉眼觀察,取 5 µl 寬范圍彩色預(yù)染蛋白質(zhì)Marker 加入到凝膠(1 mm 厚 mini-gel)孔內(nèi);如果進(jìn)行印跡實(shí)驗(yàn),取 3 µl 電泳。若加樣孔較大,可適當(dāng)增加寬范圍彩色預(yù)染蛋白質(zhì)Marker 的用量。該產(chǎn)品適用于蛋白質(zhì)凝膠電泳和蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)膜等(從PAGE 膠轉(zhuǎn)移 到 NC 膜或 PVDF膜上)實(shí)驗(yàn)。

電泳條件[1]

凝膠濃度為 12-15% SDS-PAGE,120-200 V電泳 30-50 min(Mini 電泳裝置)。

應(yīng)用 [2]

CN200910200181.1公開了自發(fā)光材料的新應(yīng)用,用于在化學(xué)發(fā)光蛋白質(zhì)免疫印跡實(shí)驗(yàn)中的X-射線膠片上顯示蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)。

本發(fā)明還公開了一種含有自發(fā)光材料的組合物,包括自發(fā)光材料,連接劑和填充劑。以及一種改良了的可以在X-射線膠片上顯示蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)的化學(xué)發(fā)光Western blot方法。通過在常規(guī)化學(xué)發(fā)光Western blot操作過程中,X-ray光片曝光前用本發(fā)明試劑涂抹在預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)位置,曝光后就能在X-ray光片上得到清晰的蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)顯影帶,達(dá)到測(cè)量目的蛋白條帶的目的,有效的彌補(bǔ)了常規(guī)化學(xué)發(fā)光Western blot的不足,大大改善了Western blot技術(shù),廣泛適用于科研實(shí)驗(yàn)。所使用試劑制備方法,綠色環(huán)保、對(duì)人體無任何毒害作用。

注意事項(xiàng)[1]

1.電泳時(shí)間過長(zhǎng)將導(dǎo)致蛋白條帶發(fā)散現(xiàn)象。

2.不適合低電壓長(zhǎng)時(shí)間(過夜)轉(zhuǎn)膜。

主要參考資料

[1] 寬范圍彩色預(yù)染蛋白質(zhì)Marker說明書

[2] CN200910200181.1自發(fā)光材料用于化學(xué)發(fā)光Western blot的用途及其組合物

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