背景及概述^[1]

當(dāng)歸為傘形科植物當(dāng)歸的干燥根，當(dāng)歸味甘、辛、性溫，具有補血活血、調(diào)經(jīng)止痛、促進血液循環(huán)、抗炎鎮(zhèn)痛、保肝利膽、潤腸通便等功效。當(dāng)歸藥用歷史悠久，歷代本草均有記載，是中醫(yī)常用中草藥之一，素有“十方九歸”之稱。在衛(wèi)生部公布的《關(guān)于進一步規(guī)范保健食品原料管理的通知》中，當(dāng)歸為可用于保健食品的原料。

當(dāng)歸油具有補血活血、促進血液循環(huán)、緩解血管平滑肌痙攣、抗炎鎮(zhèn)痛、平喘、保肝利膽等作用，可治療月經(jīng)不調(diào)、痛經(jīng)、子宮肌瘤及哮喘治療等病癥，也被用于治療心腦血管疾病，是目前市場上較為暢銷的醫(yī)藥中間體和保健食品原料，同時當(dāng)歸油也還廣泛應(yīng)用于化妝品及香料工業(yè)。經(jīng)我們檢測分析，當(dāng)歸油中已鑒定出52種成份，其中最主要成份為藁本內(nèi)酯，含量45～65%，是評價當(dāng)歸油質(zhì)量的重要指標(biāo)，值得重視的是藁本內(nèi)酯長時間受熱易引起異構(gòu)化，失去藥理作用。

目前提取當(dāng)歸油的方法一般有水蒸汽蒸餾法、有機溶劑萃取法以及超臨界CO2流體萃取法。水蒸汽蒸餾法雖成本低，但提取溫度高，容易使沸點較低成分揮發(fā)，而使當(dāng)歸油得率較低，僅為0.4%；有機溶劑萃取法常用正己烷、乙醚、石油醚、乙酸乙酯、乙醇等做溶劑，因溶劑易燃易爆，生產(chǎn)安全性差，并且產(chǎn)品存在溶劑殘留，影響其品質(zhì)和質(zhì)量，也影響其應(yīng)用，以上兩種方法都存在著明顯的缺點。

超臨界CO2流體萃取法與以上兩種傳統(tǒng)提取方法相比，其可以在較低的溫度條件下完成提取分離，無有機溶劑殘留，對于提取分離揮發(fā)性物質(zhì)、脂溶性物質(zhì)、高熱敏性物質(zhì)顯示出獨特的優(yōu)勢，但超臨界CO2流體萃取法因設(shè)備設(shè)計制造一次性投資大，系統(tǒng)運行能耗高，而且目前國內(nèi)只能生產(chǎn)3000L超臨界萃取裝置，原料處理量有限，生產(chǎn)成本居高不下，工藝的經(jīng)濟性差。

成分^[2-3]

當(dāng)歸油包括中性、酸性和酚性3種，其中中性油占揮發(fā)油總成分的89%，中性油中主要有藁本內(nèi)酯類、川芎內(nèi)酯類、亞丁基苯酞等成分。不同的提取方法提取當(dāng)歸油在化學(xué)成分上有較大的差異，選擇用超臨界CO2萃取法提取當(dāng)歸中揮發(fā)油，聯(lián)用GC-MS技術(shù)分析揮發(fā)油有效成分，含量最高的為Z-藁本內(nèi)酯、E-藁本內(nèi)酯，達(dá)79.829%；用硅膠柱進行薄層分離，得到4個藁本內(nèi)酯類成分，當(dāng)酸（Z）-藁本內(nèi)酯-11-醇酯是首次當(dāng)歸油鑒定的結(jié)構(gòu)成分。

當(dāng)歸油成分含量因種植方式不同也會產(chǎn)生一定的差異，用GC-MS技術(shù)分別測定野生當(dāng)歸和人工種植當(dāng)歸揮發(fā)油的化學(xué)成分，野生當(dāng)歸油含量（1.14%）比人工栽培（0.4%）高2倍多。人工種植當(dāng)歸的揮發(fā)油中含量最高的是藁本內(nèi)酯，其次為丁烯基苯酞、反式羅勒烯、α-蒎烯，野生當(dāng)歸的揮發(fā)油GC-MS圖譜中，含量最高的是α-蒎烯和β-反式羅勒烯二者含量占揮發(fā)油含量的80%以上，而苯酞類成分含量在野生當(dāng)歸揮發(fā)油中較低，丁烯基苯酞含量僅為0.75%，藁本內(nèi)酯未檢測出。野生當(dāng)歸與人工栽培當(dāng)歸不僅是揮發(fā)油含量的差異，而且揮發(fā)油中化學(xué)成分差異也很顯著，可能與生長環(huán)境有關(guān)。

藥理作用^[2]

1. 降壓作用

原發(fā)性高血壓是一種多因素導(dǎo)致的疾病，其中腎素-血管緊張素系統(tǒng)過度活動是其發(fā)病機制之一。給予自發(fā)性高血壓大鼠不同劑量當(dāng)歸油后發(fā)現(xiàn)當(dāng)歸油有明顯的降壓效果，且使模型大鼠血清中血管緊張素II、腎素的水平及血管ET-1和VEGF水平降低，不同濃度的當(dāng)歸油能不同程度的改善高血壓大鼠的心肌橫紋且能夠緩解動脈血管彈力纖維增生，改善胸主動脈內(nèi)皮形態(tài)和內(nèi)膜彈力纖維度，從而說明當(dāng)歸油有明顯的降壓效果，對胸主動脈內(nèi)皮及高血壓引起的心肌損傷有保護作用。

研究表明血管緊張素轉(zhuǎn)換酶-2/血管緊張素-(1-7)/Mas（ACE2/Ang(1-7)/Mas）受體軸即非經(jīng)典的腎素-血管緊張素軸，具有保護作用能拮抗經(jīng)典的ACE/AngII/AT1R軸的細(xì)胞增殖及高血壓效應(yīng)，實驗表明當(dāng)歸油不僅能升高ACE2mRNA及蛋白表達(dá)水平，而且能提高Mas受體mRNA及蛋白表達(dá)水平，初步認(rèn)為當(dāng)歸可以作用于ACE2/Ang(1-7)/Mas受體軸，通過拮抗ACE/AngII/AT1R的作用，激活A(yù)CE2基因，將AngII轉(zhuǎn)化為Ang(1-7)，促進Mas受體的表達(dá)而發(fā)揮降壓作用。

觀察當(dāng)歸油對用N-硝基-L-精氨酸灌胃建立高血壓模型大鼠的降壓作用，發(fā)現(xiàn)給予當(dāng)歸油治療后，高血壓大鼠收縮壓下降明顯，血清內(nèi)皮素-1(ET-1)、血管細(xì)胞黏附分-1(VCAM-1)、超敏C反應(yīng)蛋白(CRP)水平及其mRNA表達(dá)降低，說明當(dāng)歸油可能通過降低高血壓炎癥因子的表達(dá)進而抑制血管炎癥反應(yīng)達(dá)到降壓的作用。

2. 對缺血再灌注損傷的保護作用

有研究表明當(dāng)歸油對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的保護作用機制可能是當(dāng)歸油提高了腦組織抗氧化能力，具體表現(xiàn)為有效改善了腦缺血再灌注損傷大鼠的神經(jīng)功能，腦含水量、毛血管通透性、腦梗死體積比以及血清NO、NOS含量顯著降低，而SOD、GSH-Px活性明顯增強。

臨床證實，腦組織缺血可以引起大腦神經(jīng)元細(xì)胞不可逆的損傷甚至死亡，對PC12細(xì)胞經(jīng)“缺血缺氧”在“復(fù)糖復(fù)氧”建立缺血再灌注損傷細(xì)胞模型，加入當(dāng)歸油后發(fā)現(xiàn)細(xì)胞存活率明顯升高，細(xì)胞膜通透性、細(xì)胞抗缺氧能力得到改善，細(xì)胞凋亡過程中關(guān)鍵酶caspase-3活性升高，促進缺血再灌注損傷細(xì)胞p-ERK1/2蛋白的表達(dá)；在濃度為6.25-25μg/mL范圍內(nèi)，減少受損細(xì)胞酸性自噬泡的數(shù)量，25μg/mL時能抑制自噬相關(guān)蛋白Beclin-1、Atg5、LC3B-Ⅱ的表達(dá)，表明當(dāng)歸揮發(fā)油可能通過激活ERK信號通路抑制缺血再灌注細(xì)胞損傷細(xì)胞的凋亡；或可能通過抑制自噬減輕缺血再灌注細(xì)胞的損傷。

3. 平喘作用

采用注射卵清白蛋白(OVA)與氫氧化鋁致敏、OVA霧化吸入激發(fā)來建立哮喘動物模型，研究當(dāng)歸油平喘作用及其作用機制。實驗發(fā)現(xiàn)在建立模型過程中當(dāng)歸油明顯緩解模型大鼠的行為表現(xiàn)，降低血清和肺泡灌洗液（BALF）中IL-4水平，提高BALF中IFN-γ水平，提高肺組織T-bet蛋白的表達(dá)，降低GATA-3蛋白表達(dá)，改善肺組織病理學(xué)，減輕哮喘鼠支氣管上皮細(xì)胞脫落和炎癥細(xì)胞浸潤程度；進一步實驗發(fā)現(xiàn)當(dāng)歸油劑量在60、120、240mg/kg時能維持哮喘小鼠體重的正常增長，抑制IL-17A和RORγt的表達(dá)，當(dāng)歸油通過調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的活性及改善肺組織病理學(xué)可能是其發(fā)揮平喘作用的機制。

4. 調(diào)節(jié)胃腸功能

前期研究表明當(dāng)歸油對不同種屬動物離體胃腸平滑肌均有舒張作用，且呈濃度依賴性；當(dāng)歸不同炮制品揮發(fā)油也均能不同程度的調(diào)節(jié)胃腸功能及活動。在左旋精氨酸和阿托品誘導(dǎo)的實驗性小鼠胃腸動力障礙實驗中，高、中、低劑量當(dāng)歸油（2.67，1.33，0.67mg/kg）能降低模型小鼠胃內(nèi)殘留率，升高血清胃動素水平，增加小腸推進率縮短黑便排出時間，中、高劑量能升高模型小鼠血清胃泌素水平，表明當(dāng)歸油可能通過促進胃腸激素分泌等促進胃腸平滑肌收縮進而改善實驗性胃腸動力障礙。

采用生物信號采集分析系統(tǒng)，從電生理角度分析當(dāng)歸油對腸平滑肌的作用，實驗結(jié)果表明當(dāng)歸油對正常大鼠十二指腸慢波肌電影響不明顯，而對多潘立酮、新斯的明和氯化鋇誘導(dǎo)的腸功能亢進狀態(tài)的慢肌電頻率的變化呈明顯的拮抗作用，當(dāng)歸油對胃腸平滑肌作用與多巴胺受體、M受體和鈣離子通道有關(guān)。

5. 其他

將當(dāng)歸油予以高脂飼料聯(lián)合VitD3誘導(dǎo)的高脂小鼠的實驗表明當(dāng)歸油通過減輕肝細(xì)胞脂肪變性、胸主動脈內(nèi)膜損傷及心肌纖維化，抑制動脈粥樣硬化斑塊形成起到對高脂小鼠動脈粥樣硬化的保護作用。通過體外滲透實驗表明當(dāng)歸油有良好的皮膚滲透性能，當(dāng)歸油可改變角質(zhì)層結(jié)構(gòu)，增大細(xì)胞間隙，有利于藥物滲透。

實驗表明隨著當(dāng)歸油中藁本內(nèi)酯劑量的增加，對醋酸引起的小鼠扭體反應(yīng)及對熱板刺激小鼠疼痛反應(yīng)的鎮(zhèn)痛作用也提升；藁本內(nèi)酯能有效降低實驗性非細(xì)菌性前列腺炎大鼠的前列腺組織NGFmRNA的表達(dá)，且隨藁本內(nèi)酯計量的增加與前列腺組織NGFmRNA的表下降呈量效關(guān)系；由此得出當(dāng)歸油有良好的鎮(zhèn)痛抗炎作用，其中的藁本內(nèi)酯為主要的藥效物質(zhì)。

制備^[1]

一種從當(dāng)歸中提取當(dāng)歸油的方法，其特征包括如下步驟：

1）先將當(dāng)歸原料篩選、清洗、干燥到含水量≤13%，經(jīng)粉碎機粉碎至40～60目；

2）將粉碎后的當(dāng)歸原料投入萃取釜中，抽真空降至1×104Pa以下，排出萃取釜內(nèi)空氣；

3）然后用柱塞泵往萃取釜內(nèi)導(dǎo)入四氟乙烷溶液，通過視鏡觀察液位淹沒當(dāng)歸原料為止；

4）啟動加熱攪拌，開始萃取，萃取壓力為0.8～1.5MPa，萃取溫度為35～40℃，萃取時間為40～45min；

5）接著在分離釜中進行減壓升溫蒸發(fā)分離，升溫并保持分離溫度45～50℃，用隔膜壓縮機抽負(fù)壓逐漸降壓到5×102Pa，分離時間為25～30min；

6）亞臨界萃取結(jié)束后，合并兩次萃取得到的當(dāng)歸毛油經(jīng)過高速離心機離心分離、過濾，得到當(dāng)歸油。

主要參考資料

[1] CN201210457831.2從當(dāng)歸中提取當(dāng)歸油的方法

[2] 當(dāng)歸油研究新進展

[3] 當(dāng)歸油研究進展