Tris-HCl緩沖液是一種常用的生物化學(xué)緩沖劑，其有效 pH 范圍通常在pH7.0-9.0之間。Tris（三羥甲基氨基甲烷）是一種應(yīng)用廣泛的有機(jī)物，化學(xué)式為C4H11NO3，白色結(jié)晶顆粒。1M Tris-HCl (pH8.8)溶液，可用于配制SDS-PAGE或native PAGE的上層膠，用于蛋白電泳分離。
配制1 M Tris-HCl緩沖液的方法如下：
稱量121.1g Tris置于1L燒杯中。
加入約800mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?/p>
根據(jù)所需的pH值，按下表量加入濃鹽酸進(jìn)行調(diào)節(jié)：
pH 7.4：約70mL濃鹽酸
pH 7.6：約60mL濃鹽酸
pH 8.0：約42mL濃鹽酸
將溶解定容至1L。
高溫高壓滅菌后，室溫保存。
配制1.5 M Tris-HCl緩沖液的步驟如下：
稱取181.7g Tris置于1L燒杯中。
加入約800mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?/p>
用濃鹽酸調(diào)pH值至8.8。
將溶液定容至1L。
高溫高壓滅菌后，室溫保存。
注意：應(yīng)使溶液冷卻至室溫后再調(diào)定pH值，因為Tris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大，溫度每升高1℃，溶液的pH值大約降低0.03個單位。