背景及概述^[1-2]

腎細(xì)胞系又稱聚集細(xì)胞，成群分布于昆蟲體內(nèi)具有排泄功能的細(xì)胞。起源于中胚層，位置因昆蟲種類不同而異。位于背血竇內(nèi)的稱圍心細(xì)胞。胞內(nèi)常具有一個以上的核和豐富的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、膜泡和質(zhì)膜內(nèi)褶，具有吸收血淋巴中膠體顆粒進(jìn)行中間代謝，以及貯存某些代謝廢物的功能。

細(xì)胞培養(yǎng)方法^[2]

BHK-21細(xì)胞即敘利亞倉鼠腎細(xì)胞(BabyHamsterKidneycell，BHK-21或BHK21)，該細(xì)胞系于1961年由MacphersonIA、StokerMGP建系，源自5只未辨性別的1天齡倉鼠腎，廣泛用于增殖病毒生產(chǎn)疫苗，如口蹄疫疫苗。原始的BHK-21細(xì)胞株為貼壁生長型的細(xì)胞，甘肅省動物細(xì)胞工程技術(shù)研究中心將其馴化成了可無血清全懸浮培養(yǎng)型的細(xì)胞。BHK-21/敘利亞倉鼠腎細(xì)胞系BHK-21形態(tài)特性：上皮樣；生長特性：貼壁生長；BHK-21/敘利亞倉鼠腎細(xì)胞系BHK-21屬專利保藏，其特征特性尚未公開。

BHK-21/敘利亞倉鼠腎細(xì)胞系BHK-21培養(yǎng)條件：MEM-EBSSMinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarlesBalancedSalts)10%FBS；傳代方法：1：3傳代，3-4天傳1次；傳代情況C5。為探索懸浮培養(yǎng)型BHK-21/敘利亞倉鼠腎細(xì)胞系BHK-21的生長規(guī)律和接種密度，以3.0×105個/mL、4.0×105個/mL、5.0×105個/mL、6.0×105個/mL和7.0×105個/mL等5個接種密度培養(yǎng)了懸浮培養(yǎng)型BHK-21細(xì)胞，繪制了細(xì)胞生長曲線和活力變化曲線.結(jié)果顯示，懸浮培養(yǎng)型BHK-21細(xì)胞生長曲線呈"S"型，接種培養(yǎng)前24h細(xì)胞處于適應(yīng)期，生長曲線上密度增長不大，期后細(xì)胞進(jìn)入對數(shù)增長期，生長密度呈指數(shù)增長.以3.0×105個/mL和4.0×105個/mL接種培養(yǎng)的在120h達(dá)到增殖密度，分別為4.65×106個/mL和5.59×106個/mL，倍增時間分別為26.9h和26.7h；以5.0×105個/mL、6.0×105個/mL和7.0×105個/mL接種培養(yǎng)的在96h就達(dá)到增殖密度，分別為5.14×106個/mL、5.36×106個/mL和5.1×106個/mL，倍增時間分別為22.4h、24.1h和25.2h.各組在培養(yǎng)的96h以前細(xì)胞活力均在90%以上且變化較小，120h和144h時細(xì)胞活力開始下降，且接種密度越高活力下降越快.該細(xì)胞以4.0×105個/mL、5.0×105個/mL、6.0×105個/mL接種培養(yǎng)能達(dá)到較高培養(yǎng)密度，細(xì)胞生長快，且細(xì)胞峰值持續(xù)時間長。

主要參考資料

[1] 農(nóng)業(yè)大詞典

[2] 懸浮培養(yǎng)型BHK-21細(xì)胞的生長規(guī)律和不同接種密度培養(yǎng)效果的研究