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禽流感病毒H5亞型(AIV-H5)核酸試劑盒(熒光-PCR法)的應(yīng)用

2025/8/20 9:27:44 作者:云霄

背景[1]

禽流感病毒H5亞型(AIV-H5)核酸試劑盒(熒光-PCR法)適用于禽流感病毒H5亞型檢測(cè),可用于臨床禽流感感病毒H5亞型感染的輔助診斷,但不作確診使用。


禽流感病毒H5亞型(AIV-H5)核酸試劑盒(熒光-PCR法).png

禽流感病毒H5亞型(AIV-H5)核酸試劑盒(熒光-PCR法)

儲(chǔ)存條件及有效期:避光-20℃以下保存,避免反復(fù)凍融,有效期12個(gè)月。

適用儀器:ABI系列、Bio-Rad系列、Agilent Stratagene MX系列、Roche LightCycler R480、Cepheid SmartCycler、Rotor-Gene系列、杭州博日系列等多通道實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀。

應(yīng)用[2]

禽流感病毒H5亞型(AIV-H5)核酸試劑盒(熒光-PCR法)可以用于表達(dá)不同分支H5及H7禽流感病毒HA基因重組鴨瘟病毒疫苗株的構(gòu)建和評(píng)價(jià)

禽流感(Avian influenza,AI)是由禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)引起的一種感染和疾病綜合征。AIV是一種重要的人獸共患病病原,宿主廣泛,主要感染禽類,部分亞型AIV可感染人類等哺乳動(dòng)物。水禽是AIV的自然儲(chǔ)存宿主,可攜帶多種亞型AIV,且不發(fā)病。水禽是我國(guó)AIV有效防控關(guān)鍵風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn),鴨作為水禽中最主要的種類,占水禽種類的絕大多數(shù),分布廣泛。

以鴨瘟病毒,即鴨病毒性腸炎病毒(Duck enteritis virus,DEV)疫苗株為載體,利用該毒株US7和US8基因之間的復(fù)制非必需區(qū),插入2.3.4分支代表性毒株A/duck/Anhui/1/2006(H5N1)株病毒HA基因表達(dá)框架,構(gòu)建和研制了禽流感重組鴨瘟疫苗。該疫苗已獲得一類新獸藥證書,按照鴨瘟弱毒疫苗免疫程序接種鴨,可誘導(dǎo)對(duì)H5亞型禽流感和鴨瘟持續(xù)完全保護(hù)。為進(jìn)一步研制與當(dāng)前我國(guó)家禽中監(jiān)測(cè)到的AIV抗原匹配性更加良好的禽流感重組鴨瘟疫苗開展本研究。本研究共包括三部分,一是分別構(gòu)建并鑒定了表達(dá)2.3.4.4h分支H5亞型和H7N9亞型病毒HA基因的重組病毒rDEV-13和rDEV H7-4;二是進(jìn)一步評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室前期構(gòu)建的表達(dá)2.3.4.4b分支H5亞型HA基因的rDEV-14對(duì)當(dāng)前流行AIV毒株的免疫效力研究,并進(jìn)行了rDEV-13和rDEV-14混合使用免疫效力研究;三是開展了rDEV-13、rDEV-14和rDEV H7-4三價(jià)混合免疫效力評(píng)價(jià)研究。本研究利用實(shí)驗(yàn)室前期建立的鴨瘟病毒多片段拯救系統(tǒng),將H5亞型2.3.4.4h分支的代表毒株A/duck/Fujian/S1424/2020(H5N6)(DK/FJ/S1424/20)和H7亞型A/chicken/Yunnan/SD024/2021(H7N9)(CK/YN/SD024/21)的HA基因分別插入U(xiǎn)S7~US8之間,拯救出重組病毒rDEV-13和rDEV H7-4。用禽流感病毒H5亞型(AIV-H5)核酸試劑盒(熒光-PCR法)、間接免疫熒光(IFA)以及Western blot等試驗(yàn)進(jìn)行系列體外試驗(yàn)鑒定。禽流感病毒H5亞型(AIV-H5)核酸試劑盒(熒光-PCR法)結(jié)果顯示,第5、10、15代的rDEV-13和rDEV H7-4基因中均可檢測(cè)到HA基因表達(dá)框的存在。

參考文獻(xiàn)

[1]R禽流感的診斷與防制.2002年第12期《畜禽業(yè)》

[2]張小雨.表達(dá)不同分支H5及H7禽流感病毒HA基因重組鴨瘟病毒疫苗株的構(gòu)建和評(píng)價(jià)[D].中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院,2024.

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