簡介

APR-246（又稱PRIMA-1met或Eprenetapopt）是PRIMA-1的結構類似物，具有更好的活性和滲透性。PRIMA-1是一種能夠重新激活突變型p53蛋白的小分子化合物，而APR-246在體內可轉化為活性化合物MQ（methylene quinuclidinone），通過作用于突變p53蛋白的硫醇基團，恢復其空間構象，從而恢復其轉錄活性和腫瘤抑制功能。APR-246已被證實在多種實體瘤和血液腫瘤中具有抗腫瘤活性，目前已在多發(fā)性骨髓瘤和慢性淋巴細胞白血病的治療中進入III期臨床試驗，但尚未有針對DLBCL的臨床研究報道[1]。

APR-246的性狀

在DLBCL細胞系中的敏感性差異

細胞增殖實驗（MTS法）顯示，不同類型的TP53突變DLBCL細胞系對APR-246的敏感性存在顯著差異。TP53野生型細胞系（如OCI-LY3、VAL、Dohh2）以及部分突變型細胞系（如OCI-LY1、OCI-LY7、TMD8）對低濃度APR-246敏感，其中OCI-LY7（第7號外顯子Gly245Asp突變）最為敏感，24小時IC50約為18μM。而U2932、SUDHL-6、SUDHL-10和SUDHL-16等突變型細胞系對APR-246不敏感，IC50高于95μM。這表明APR-246的殺傷效果與TP53突變類型密切相關，錯義突變細胞系更易響應，而剪接突變或無義突變細胞系則響應較差[1]。

誘導細胞死亡的主要機制

RNA-seq分析顯示，APR-246處理后，OCI-LY7細胞中與p53相關的生物過程（如DNA損傷反應、細胞周期、凋亡和自噬）顯著富集。GO和KEGG分析提示自噬、凋亡、p53、AMPK和mTOR等信號通路發(fā)生顯著變化。進一步實驗表明，APR-246誘導的細胞死亡主要依賴自噬而非凋亡。使用自噬抑制劑（HCQ）處理后，OCI-LY7細胞存活率顯著升高，而凋亡抑制劑（QVD-OPH）作用較弱。Western blotting結果顯示，自噬相關蛋白SESN2和表觀遺傳調控蛋白CREBBP表達隨APR-246濃度升高而上調，提示APR-246通過激活自噬通路誘導TP53突變型DLBCL細胞死亡[1]。

在小鼠體內的抗腫瘤效應

為驗證APR-246在體內的抗腫瘤活性，研究者構建了NSG小鼠皮下移植OCI-LY7細胞模型。接種后第10天成瘤，隨機分為對照組、40 mg/kg組和80 mg/kg組，每日腹腔注射APR-246，連續(xù)14天。結果顯示，APR-246顯著抑制腫瘤生長，80 mg/kg組腫瘤體積最小，呈劑量依賴性。解剖發(fā)現，給藥組腫瘤組織出現液化壞死，周圍伴有白色積液，提示APR-246在體內可誘導TP53突變型DLBCL細胞死亡。該實驗為APR-246用于治療TP53突變型DLBCL提供了臨床前理論依據[1]。

參考文獻

[1] 任天元. 彌漫大B細胞淋巴瘤中TP53基因突變特征和臨床意義及APR-246誘導細胞死亡的機制研究[D]. 天津醫(yī)科大學, 2021. DOI:10.27366/d.cnki.gtyku.2021.000844.