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羅丹明 123的應用研究

2025/11/26 9:12:36 作者:火星人

羅丹明 123是一種常用的陽離子型熒光染料,為紅棕色粉末或結晶,易溶于水、乙醇、甲醇等極性溶劑,熒光性能穩(wěn)定。羅丹明 123激發(fā)波長約507nm,發(fā)射波長約529nm,發(fā)出明亮的黃綠色熒光。羅丹明 123可以通透細胞膜的選擇性染色活細胞線粒體的陽離子綠色熒光染料。其作為一種熒光探針,許多研究將其視作為染色膽管細胞一種標記染料。

羅丹明 123

應用研究

1、羅丹明123(Rhodamine123,Rdm123)染料通常作為染色膽管細胞一種標記染料,黃迪等人將100μM的羅丹明 123分別染色加入或不加入Vrp孵育的人肝癌細胞系HepG2、原代大鼠正常肝細胞和原代人肝細胞原代肝細胞,對比細胞在特定時間的熒光強度變化。大鼠來源的膽管細胞的誘導采用Katsuda報道CLiP技術制作,誘導的膽管細胞分別染色加入或不加入Vrp孵育,對比細胞在特定時間的熒光強度變化。結果羅丹明 123可以染色肝細胞,包括肝癌細胞(HepG2)和正常肝細胞(PHH和PRH),Vrp對其攝入和排泄無明顯影響.肝細胞之間形成膽小管(BC)結構,肝細胞攝取羅丹明 123染料不會排泄后存留膽小管結構中,羅丹明 123可以染色誘導的膽管細胞結構,Vrp可以抑制其攝入排泄[1]。

人肝癌細胞系HepG2攝取羅丹明 123染料在 5min、30min和120min后的圖像

2、為研究離體人支氣管上皮經氟尿嘧啶(5-FU)損傷前后及修復過程中羅丹明 123的染色及p-糖蛋白的表達情況。周瑩等人取5-FU作用前后及修復3、6、24h的人支氣管上皮,進行如下實驗:采用酶消化法獲取細胞懸液,羅丹明 123染色,流式細胞儀分析;用免疫熒光及蛋白印跡法觀察P-糖蛋白的表達,RT-PCR法檢測P-糖蛋白mRNA的表達.結果5-FU作用后支氣管上皮中羅丹明 123陰性染色細胞占活細胞的比例較正常組增多;隨著損傷的修復,羅丹明 123陰性活細胞所占比例逐漸降至接近正常。免疫熒光法可見5-FU作用后的上皮細胞涂片上有P-糖蛋白的表達,在蛋白及mRNA水平,5-FU作用后支氣管上皮的P-糖蛋白表達均較正常組增加[2]。

參考文獻

[1] 黃迪,黃宇,黃子圣,等. 羅丹明123聯(lián)合MDR1抑制劑維拉帕米鑒別肝細胞和膽管細胞[J]. 江西醫(yī)藥,2021,56(11):1868-1871,1884. DOI:10.3969/j.issn.1006-2238.2021.11.012.

[2] 周瑩,賈心善. 羅丹明123及P-糖蛋白在人支氣管損傷修復過程中的表達[J]. 中國現(xiàn)代醫(yī)學雜志,2005,15(13):1930-1934. DOI:10.3969/j.issn.1005-8982.2005.13.003.

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