羅丹明 123是一種常用的陽(yáng)離子型熒光染料，為紅棕色粉末或結(jié)晶，易溶于水、乙醇、甲醇等極性溶劑，熒光性能穩(wěn)定。羅丹明 123激發(fā)波長(zhǎng)約507nm，發(fā)射波長(zhǎng)約529nm，發(fā)出明亮的黃綠色熒光。羅丹明 123可以通透細(xì)胞膜的選擇性染色活細(xì)胞線粒體的陽(yáng)離子綠色熒光染料。其作為一種熒光探針，許多研究將其視作為染色膽管細(xì)胞一種標(biāo)記染料。

應(yīng)用研究

1、羅丹明123(Rhodamine123,Rdm123)染料通常作為染色膽管細(xì)胞一種標(biāo)記染料,黃迪等人將100μM的羅丹明 123分別染色加入或不加入Vrp孵育的人肝癌細(xì)胞系HepG2、原代大鼠正常肝細(xì)胞和原代人肝細(xì)胞原代肝細(xì)胞,對(duì)比細(xì)胞在特定時(shí)間的熒光強(qiáng)度變化。大鼠來(lái)源的膽管細(xì)胞的誘導(dǎo)采用Katsuda報(bào)道CLiP技術(shù)制作，誘導(dǎo)的膽管細(xì)胞分別染色加入或不加入Vrp孵育,對(duì)比細(xì)胞在特定時(shí)間的熒光強(qiáng)度變化。結(jié)果羅丹明 123可以染色肝細(xì)胞,包括肝癌細(xì)胞(HepG2)和正常肝細(xì)胞(PHH和PRH),Vrp對(duì)其攝入和排泄無(wú)明顯影響.肝細(xì)胞之間形成膽小管(BC)結(jié)構(gòu),肝細(xì)胞攝取羅丹明 123染料不會(huì)排泄后存留膽小管結(jié)構(gòu)中，羅丹明 123可以染色誘導(dǎo)的膽管細(xì)胞結(jié)構(gòu),Vrp可以抑制其攝入排泄[1]。

2、為研究離體人支氣管上皮經(jīng)氟尿嘧啶(5-FU)損傷前后及修復(fù)過(guò)程中羅丹明 123的染色及p-糖蛋白的表達(dá)情況。周瑩等人取5-FU作用前后及修復(fù)3、6、24h的人支氣管上皮,進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn):采用酶消化法獲取細(xì)胞懸液,羅丹明 123染色,流式細(xì)胞儀分析;用免疫熒光及蛋白印跡法觀察P-糖蛋白的表達(dá),RT-PCR法檢測(cè)P-糖蛋白mRNA的表達(dá).結(jié)果5-FU作用后支氣管上皮中羅丹明 123陰性染色細(xì)胞占活細(xì)胞的比例較正常組增多;隨著損傷的修復(fù),羅丹明 123陰性活細(xì)胞所占比例逐漸降至接近正常。免疫熒光法可見(jiàn)5-FU作用后的上皮細(xì)胞涂片上有P-糖蛋白的表達(dá),在蛋白及mRNA水平,5-FU作用后支氣管上皮的P-糖蛋白表達(dá)均較正常組增加[2]。

參考文獻(xiàn)

[1] 黃迪,黃宇,黃子圣,等. 羅丹明123聯(lián)合MDR1抑制劑維拉帕米鑒別肝細(xì)胞和膽管細(xì)胞[J]. 江西醫(yī)藥,2021,56(11):1868-1871,1884. DOI:10.3969/j.issn.1006-2238.2021.11.012.

[2] 周瑩,賈心善. 羅丹明123及P-糖蛋白在人支氣管損傷修復(fù)過(guò)程中的表達(dá)[J]. 中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,2005,15(13):1930-1934. DOI:10.3969/j.issn.1005-8982.2005.13.003.