簡述
黃柏酮是從黃柏、白鮮皮等植物中提取出來的一種檸檬苦素類三萜化合物，具有抗菌、抗炎、抗氧化和抑制腫瘤等多種藥理活性。常溫常壓下，該物質表現為白色結晶狀粉末，不溶于水，易溶于氯仿、丙酮、冰醋酸等有機溶劑，難溶于乙醚，稍溶于乙醇。大量研究表明，黃柏酮可以用于治療皮膚感染、消化系統感染、呼吸道感染以及某些腫瘤等疾病。此外，它還可以用作抗氧化劑，幫助抵抗自由基的損害和預防心血管疾病等慢性疾病的發(fā)生?？偟膩碚f，黃柏酮是一種具有廣泛應用前景的天然藥物成分。
含量測定
采用高效液相色譜法建立關黃柏葉中黃柏酮的含量測定方法（高效液相色譜法）主要內容如下：WondaSil C18 Superb色譜柱(150 mm×4.6 mm，5μm)，乙腈-0.1%醋酸水(V：V=49：51)為流動相，流速為1.0 mL/min，檢測波長為215 nm，柱溫為30℃。結果，黃柏酮在1.68~52.74μg/mL范圍內，線性關系良好(R2=0.9999)。供試品溶液在24 h內穩(wěn)定性良好，方法的精密度高，平均加樣回收率為102.2%，RSD為2.27%。關黃柏葉中黃柏酮的含量為1.604 mg/g[1]。
應用
黃柏酮在藥物治療領域應用廣泛，不僅可用于防治潰瘍性結腸炎[2]。還可用于制備治療或預防鉑類或氨基糖苷類藥物或噪聲引起的聽力損失的藥物。實驗結果表明，黃柏酮對順鉑、氨基糖苷類藥物或噪聲誘導的小鼠聽力損失具有保護作用，對順鉑、氨基糖苷類藥物或噪聲誘導的耳蝸毛細胞丟失具有改善作用。黃柏酮可有效用于順鉑、氨基糖苷類藥物導致的藥物性聽力損失和噪聲性聽力損失的預防和治療，具有開發(fā)成相應藥物的應用前景[3]。
文獻還報道了一種黃柏酮聯合派姆單抗的藥物組合物，通過動物實驗，對組織進行免疫染色和蛋白組學分析，表明該組合物從白鮮皮中分離的三萜類化合物黃柏酮聯合派姆單抗具有很好的抗胰腺癌活性，且具有良好的安全性，可作為活性化合物，用于制備治療胰腺癌的藥物[4]。
醫(yī)藥保健品領域則提供了一種黃柏酮的新的醫(yī)藥用途，即黃柏酮在制備治療卒中后中樞性疼痛的藥物和保健品中的用途。經過試驗驗證，黃柏酮可以明顯降低小鼠丘腦出血后死亡率，并緩解丘腦出血引起的機械和溫度刺激痛覺過敏[5]。
有關研究
炎癥是機體對外界刺激的一種自身反應，適當的炎癥反應可以修復受損組織，增強機體抗病機能，而過度的或持續(xù)的炎癥反應均會引起組織損傷和誘發(fā)疾病，其本質就是機體內促炎/抗炎自穩(wěn)失衡所致。巨噬細胞作為調控炎癥反應的主要細胞，主要表現為活化后吞噬入侵的病原體并釋放調節(jié)免疫應答的細胞因子。黃柏酮(OBA)是一種檸檬苦素類三萜化合物，主要分布于蕓香科柑橘屬植物以及能清熱解毒燥濕的黃柏，白鮮皮等中藥中。黃柏和白鮮皮在臨床常用于炎癥疾患，作為主要有效成分，黃柏酮是否具有抗炎作用迄今尚未見報道。因此，研究人員對其抗炎作用及分子機制展開了研究。
實驗采用經典的細菌脂多糖(LPS)誘導小鼠巨噬細胞株RAW264.7細胞模型考察黃柏酮抗炎作用。Griess試劑法測定一氧化氮(NO)；酶聯免疫法(ELISA)測定白介素-6(IL-6)，IL-1β和單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)；實時定量PCR(RT-PCR)法分析一氧化氮合酶(iNOS)，IL-1β，IL-6和MCP-1 mRNA變化；采用報告基因的方法測定與炎癥相關的核轉錄因子-kB(NF-kB)與活化蛋白-1(AP-1)激活;蛋白免疫印記(Western blot)法測定iNOS，p38分裂原活化蛋白激酶(p-p38/p38)，c-Jun氨基末端激酶(p-JNK/JNK)，細胞外信號調節(jié)激酶(p-ERK1/2/ERK1/2)，絲裂原蛋白活化激酶磷酸酶-1(MKP-1)蛋白表達；在計算機上使用Seaware靶點預測軟件進行黃柏酮作用靶點分析，SEA (Similarity Ensemble Approach)算法比較目標分子與已知作用靶點的小分子相似性，MOE軟件模擬配體和受體之間分子對接情況；細胞計數法考察黃柏酮對巨噬細胞遷移抑制因子(MIF)趨化巨噬細胞的作用；酶促反應法測定重組MIF活性；采用"基因靜默"的方法得到穩(wěn)定的MIF (-) RAW264.7細胞。
結果顯示，黃柏酮 (25，50，100μM)能降低iNOS，IL-6，IL-1β，MCP-1轉錄與表達，抑制AP-1激活，降低p38 MAPK磷酸化水平，增加MKP-1表達；靶點預測結果顯示黃柏酮能對接到MIF (315t)活性口袋A鏈和C鏈之間的位置（如下圖所示）。因此，聚焦于MIF，發(fā)現黃柏酮能明顯抑制MIF所致的巨噬細胞趨化，并且在非細胞系中黃柏酮還能夠直接抑制MIF酶活性。LPS刺激MIF (-) RAW264.7細胞，得到與黃柏酮處理活化RAW264.7細胞后相似的結果。以上結果說明：黃柏酮通過與MIF (315t)活性口袋A鏈和C鏈之間的位置對接抑制其功能，導致MKP-1表達增多，MKP-1再促p-p38 MAPK脫磷酸化，從而減少了AP-1下游相關促炎基因如iNOS，IL-6，IL-1β，MCP-1等的轉錄與表達，進而發(fā)揮抗炎作用[6]。
參考文獻
[1]劉璇,陳劍鋒,張司舵,等.高效液相色譜法測定關黃柏葉中黃柏酮的含量[J].廣東化工, 2023, 50(15):165-166.
[2]竇薇,任改艷,孫阿寧,等.黃柏酮在制備防治潰瘍性結腸炎的藥物中的應用.2018.
[3]高下,黎奧,錢曉云,等.黃柏酮在制備治療或預防鉑類或氨基糖苷類藥物或噪聲引起的聽力損失的藥物中的應用:202310771287[P].
[4]桑春艷,楊軍麗.黃柏酮聯合派姆單抗在制備抗胰腺癌藥物中的應用:202211705157[P].
[5]卜凡.黃柏酮在制備具有預防或治療卒中后中樞性疼痛的藥物中的應用:CN202410017012.9[P].
[6]劉芬.黃柏酮靶向抑制MIF抗炎作用研究[J].北京協和醫(yī)學院, 2016.