簡(jiǎn)述
6-二甲基氨基嘌呤(6-Dimethye amino purine,簡(jiǎn)稱6-DMAP)是一種分子式為C7H9N5,分子量為163.180的有機(jī)物。常溫常壓下,6-二甲基氨基嘌呤可以穩(wěn)定存在,性狀為白色至淡黃色晶體粉末。該物質(zhì)不僅是一種蛋白質(zhì)磷酸化抑制劑,同時(shí)還是蛋白激酶和細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(CDK)的雙抑制劑。?其核心作用機(jī)制是通過(guò)抑制特定激酶,阻止蛋白質(zhì)磷酸化過(guò)程,進(jìn)而影響成熟促進(jìn)因子(MPF)和細(xì)胞靜止因子(CSF)的活性。??

應(yīng)用
在細(xì)胞生物學(xué)研究中,6-二甲基氨基嘌呤能破壞中期紡錘體形成,抑制微管蛋白磷酸化,從而阻止極體的形成和排放,故其在多倍體誘導(dǎo)研究中具有重要應(yīng)用價(jià)值,下面就該物質(zhì)在多倍體誘導(dǎo)中的應(yīng)用實(shí)例展開(kāi)詳細(xì)介紹:
①利用6-二甲基氨基嘌呤誘導(dǎo)培育三倍體三角帆蚌。首先,獲取二倍體三角帆蚌產(chǎn)生的卵子并使之與二倍體產(chǎn)生的精子受精;然后采用抑制劑抑制第一極體或第二極體。該培育方法的特征在于抑制劑為6-二甲基氨基嘌呤,其具有價(jià)格便宜,低毒等特點(diǎn),克服了以往所用細(xì)胞松弛素B價(jià)格昂貴,毒副作用大,易對(duì)工作人員身體和環(huán)境造成危害等缺陷。用此蚌生產(chǎn)淡水珍珠,具有珠質(zhì)分泌速度快,產(chǎn)珠量高等的特點(diǎn),適合大水域養(yǎng)殖珍珠[1]。
②利用6-二甲氨基嘌呤誘導(dǎo)牡蠣四倍體。獲取三倍體牡蠣產(chǎn)生的卵子并使之與二倍體產(chǎn)生的精子受精,然后采用抑制劑抑制第一極體或第二極體即可。6-二甲基氨基嘌呤作為作用該過(guò)程的誘導(dǎo)劑,通過(guò)抑制三倍體受精卵第二極體釋放獲得的四倍體。所得四倍體不同于以往的四倍體,其細(xì)胞中雖然也含有相當(dāng)于四套染色體的染色體數(shù)目,但實(shí)質(zhì)上含有三套完整的染色體和兩個(gè)相同的半套染色體,本質(zhì)屬于非整倍體類型,與傳統(tǒng)意義上的四倍體有著遺傳學(xué)上的本質(zhì)區(qū)別[2]。
有關(guān)研究
為了研究6-二甲基氨基嘌呤對(duì)體外成熟山羊卵母細(xì)胞孤雌激活及發(fā)育的影響,研究人員采用體外成熟的山羊卵泡卵母細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料探究其對(duì)體外成熟山羊卵泡卵母細(xì)胞孤雌激活率,原核形成以及孤雌胚體外發(fā)育潛能的影響。具體地,卵母細(xì)胞用7%的乙醇和5μmol/L的離子霉素刺激處理后,分別置于含2mmol/L 6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)和不含6-DMAP的培養(yǎng)液中培養(yǎng)4h。
結(jié)果表明,6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)能顯著提高山羊卵母細(xì)胞的激活率,乙醇+6-DMAP和離子霉素+6-DMAP處理卵母細(xì)胞激活率分別為75.6%和71.1%,均顯著高于單獨(dú)使用乙醇(54.3%)和離子霉素(56.8%)處理;顯著抑制卵母細(xì)胞第二極體的排出,乙醇+6-DMAP和離子霉素+6-DMAP處理僅含1個(gè)極體的孤雌胚分別為90.3%和96.3%,顯著高于單獨(dú)使用乙醇(26.3%)離子霉素(33.3%)處理。孤雌胚體外培養(yǎng)7d,乙醇+6-DMAP和離子霉素+6-DMAP處理4-細(xì)胞發(fā)育率為45.6%和47.9%,8-細(xì)胞孤雌胚發(fā)育率為25.0%和29.6%,桑/囊胚形成率為7.4%和9.9%,均顯著高于單獨(dú)使用乙醇和離子霉素處理(P<0.05)[3]。
參考文獻(xiàn)
[1]楊品紅,李夢(mèng)軍.一種利用6-二甲氨基嘌呤誘導(dǎo)三倍體三角帆蚌培育珍珠的方法:CN200610136719.3[P].
[2]王昭萍,于瑞海,王如才,等.利用6-二甲氨基嘌呤誘導(dǎo)牡蠣四倍體的方法:CN200310114497.1[P].
[3]張果平,王金文,王德芹,等.6-二甲基氨基嘌呤對(duì)體外成熟山羊卵母細(xì)胞孤雌激活及發(fā)育的影響[J].吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào), 2008, 030(003):340-343,347.