背景[1-6]
SLAMF7抗體是表達(dá)于NK細(xì)胞和免疫細(xì)胞亞群的活化受體。最早研究發(fā)現(xiàn)其參與天然殺傷細(xì)胞(NK細(xì)胞)黏附功能。與正常漿細(xì)胞相比，多種免疫細(xì)胞包括NK細(xì)胞、NK樣T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、活化單核細(xì)胞及樹突狀細(xì)胞均低表達(dá)SLAMF7。抗體與SLAMF7結(jié)合可以激活NK細(xì)胞和固有免疫?；罨疦K細(xì)胞可直接殺死腫瘤細(xì)胞。通過SLAMF持續(xù)活化NK細(xì)胞可能激活適應(yīng)性免疫，并產(chǎn)生長期免疫力。
靶向信號淋巴細(xì)胞激活分子家族成員7（SLAMF7），也稱為CS1，它是一種表達(dá)于骨髓瘤細(xì)胞表面的糖蛋白，同時也表達(dá)于自然殺傷細(xì)胞（NK cell）和漿細(xì)胞表面，在造血譜系分化細(xì)胞的特定免疫細(xì)胞亞群中也呈較低水平的表達(dá)。表面抗原CD319（SLAMF7）是多發(fā)性骨髓瘤中正常漿細(xì)胞和惡性漿細(xì)胞的強(qiáng)標(biāo)記物。與CD138（傳統(tǒng)的漿細(xì)胞標(biāo)記物）相比，CD319/SLAMF7更加穩(wěn)定，并且能夠從延遲甚至低溫保存的樣品中強(qiáng)分離出惡性漿細(xì)胞。SLAMF7正作為免疫治療多發(fā)性骨髓瘤的靶點被進(jìn)行大量研究。
通過huLuc63抗體（Elotuzumab）誘導(dǎo)嵌合抗原受體（CAR）表達(dá)，來重置T細(xì)胞對SLAMF7的特異性，并且證明了無論是來源于患者的還是健康捐獻(xiàn)者的SLAMF7-CAR T細(xì)胞均獲得抗骨髓瘤活性。
研究人員還證實在未進(jìn)行過治療的患者和接受過蛋白酶體抑制劑和免疫調(diào)節(jié)劑（IMiDs）治療的復(fù)發(fā)性/難治性（R/R）患者的惡性漿細(xì)胞上，SLAMF7表達(dá)水平高且統(tǒng)一。在體外，SLAMF7-CAR T細(xì)胞可促使既往未治療過的和R/R原發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞快速溶解。除此之外，SLAMF7-CAR T細(xì)胞的單一管理可用于分辨小鼠移植瘤模型體內(nèi)髓內(nèi)和髓外的骨髓瘤。部分正常的淋巴細(xì)胞可表達(dá)SLAMF7，包括NK細(xì)胞、T細(xì)胞和B細(xì)胞。
通過SLAMF7-CAR修飾，CD8+和CD4+T細(xì)胞也可迅速獲得并維持SLAMF7表型，并且可迅速擴(kuò)展到治療相關(guān)的細(xì)胞劑量。Tea Gogishvili等人對SLAMF7-CAR T細(xì)胞如何識別正常的淋巴細(xì)胞進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)其誘導(dǎo)SLAMF7+/high NK細(xì)胞，CD4+和CD8+T細(xì)胞和B細(xì)胞選擇性殺傷。重要的是，SLAMF7-CAR T細(xì)胞所誘導(dǎo)的細(xì)胞殺傷可保留每個細(xì)胞集的SLAMF7-/low的部分，并保護(hù)功能性淋巴細(xì)胞，包括病毒特異性T細(xì)胞。
應(yīng)用[7][8]
SLAMF7抗體可用于HPV16 E6潛在靶基因的篩選、鑒定及其在宮頸鱗癌中的表達(dá)研究：
高危型人乳頭瘤病毒(high risk-human papillomaviruses,HR-HPVs),尤其是HPV16與宮頸癌等多種惡性腫瘤的發(fā)生與演進(jìn)存在密切的關(guān)系。HPV16等HR-HPVs中的E6和E7癌基因持續(xù)表達(dá)為宿主細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化和惡性表型維持所必需；其中,E6基因編碼的E6蛋白具有促進(jìn)細(xì)胞增殖、侵襲與轉(zhuǎn)移的作用。研究顯示,E6基因在人類基因組中無同源序列,而且僅存在于感染HPVs的細(xì)胞中。因此,E6為宮頸癌等HPVs相關(guān)腫瘤的治療提供了理想靶點。
但是,以E6為靶點治療方案均處于研究階段。盡管HPV16E6誘導(dǎo)腫瘤發(fā)生與演進(jìn)的分子機(jī)制已有較多報道,但其致癌機(jī)制復(fù)雜,報道存在差異。因此,深入研究HPV16E6的致癌機(jī)制,對探索HPV16相關(guān)腫瘤新的治療方法具有重要意義。目的篩選并驗證HPV16E6相關(guān)的潛在靶基因,并觀察它們在HPV16陽性和陰性的宮頸鱗癌組織中的表達(dá)情況,以期為研究HPV16E6和篩選出的E6相關(guān)的潛在靶基因之間的調(diào)控關(guān)系及調(diào)控機(jī)制奠定基礎(chǔ),從而豐富HPV16的致癌機(jī)制,為其相關(guān)腫瘤治療提供新靶點。
方法1.以課題組建立的轉(zhuǎn)p-Genesil-E6shRNA真核表達(dá)重組質(zhì)粒的HPV16陽性宮頸癌CaSki細(xì)胞(E6表達(dá)沉默)(實驗組)和轉(zhuǎn)p-Genesil-1質(zhì)粒(含無關(guān)shRNA)的CaSki細(xì)胞(對照組)為研究對象,通過Agilent人基因組表達(dá)譜芯片技術(shù),檢測HPV16E6表達(dá)沉默后基因表達(dá)譜的變化。p-Genesil-E6-shRNA-CaSki細(xì)胞中SLAMF7的表達(dá)顯著低于C33A細(xì)胞、SiHa細(xì)胞和p-Genesil-無關(guān)shRNA-CaSki細(xì)胞(P<0.01),C33A細(xì)胞中SLAMF7的表達(dá)表達(dá)顯著低于SiHa細(xì)胞和p-Genesil-無關(guān)shRNA-CaSki細(xì)胞(P<0.01),而SiHa細(xì)胞和p-Genesil-無關(guān)shRNA-CaSki細(xì)胞中SLAMF7的表達(dá)差異無顯著性(P>0.05)。
結(jié)論1.篩選并初步證明了MUC16、MMP3、SLAMF7、SERPINA3、ANXA10和CDH15可能是HPV16E6的潛在靶基因。2.進(jìn)一步證明了TRAIL是HPV16E6的靶基因。3.為研究HPV16E6和篩選出的與E6相關(guān)的潛在靶基因之間的調(diào)控關(guān)系及調(diào)控機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。
參考文獻(xiàn)
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