簡介

N-芴甲氧羰基-L-天冬氨酸4-烯丙酯是多肽合成專用氨基酸保護(hù)單體，常溫下為白色或類白色固體粉末。該化合物易溶于二氯甲烷、四氫呋喃等有機(jī)溶劑，主要用于固相多肽合成，可以構(gòu)建含游離天冬氨酸側(cè)鏈羧基的肽鏈中間體。

N-芴甲氧羰基-L-天冬氨酸4-烯丙酯的性狀

合成

方法一：將堿性蛋白酶交聯(lián)酶聚集體加入到二烯丙基保護(hù)的氨基酸衍生物、15.0 mL tBuOH或1,4-二惡烷和15.0 mL磷酸鹽緩沖液（pH 7.5，50 mM）中。在37°C下以200 rpm的速度搖晃混合物16小時。過濾混合物。將酶重新懸浮在50毫升飽和碳酸氫鈉水溶液中。過濾混合物。用飽和NaHCO3水溶液重復(fù)該程序兩次，用50 mL EtOAc重復(fù)兩次。用飽和NaHCO3水溶液洗滌合并的有機(jī)相。用HCl水溶液（0.1N）將合并的水相酸化至pH 1。用100 mL EtOAc（3x）萃取水相。用250毫升鹽水洗滌合并的有機(jī)層。用Na2SO4干燥有機(jī)層。真空濃縮有機(jī)層。通過與50 mL甲苯（2x）和50 mL CHCl3（2x”）共蒸發(fā)干燥層。用EtOAc/正己烷混合物進(jìn)行柱色譜，以獲得產(chǎn)物N-芴甲氧羰基-L-天冬氨酸4-烯丙酯[1]。

方法二：溶解2.1當(dāng)量N-（3-二甲基氨基丙基）-N’-乙基碳二亞胺的N-保護(hù)氨基酸衍生物。HCl、2.1當(dāng)量7-氮雜-N-羥基苯并三唑和2.1當(dāng)量二異丙基乙胺在100 mL含4.0 mL醇衍生物的CH2Cl2中的溶液。在環(huán)境溫度下攪拌混合物24小時。真空濃縮混合物以獲得油。將油在100 mL EtOAc和100 mL飽和NaHCO3水溶液之間分配。用100mL飽和NaHCO3水溶液、100mL HCl水溶液（pH 1,2x）、100mL鹽水洗滌有機(jī)相。真空濃縮有機(jī)相以獲得油。通過制備型HPLC純化油（使用15%的0.1 mL/L甲酸的H2O溶液和85%的0.1 mL/L甲酸的乙腈溶液作為洗脫劑），以獲得產(chǎn)物N-芴甲氧羰基-L-天冬氨酸4-烯丙酯[1]。

用途

N-芴甲氧羰基-L-天冬氨酸4-烯丙酯可作為多肽合成單體，經(jīng)微波偶聯(lián)、分步脫保護(hù)、肽切割純化等流程制備目標(biāo)肽中間體。例如：將N-芴甲氧羰基-L-天冬氨酸4-烯丙酯、DIC、Oxyma溶于DMF，50℃微波偶聯(lián)15 min；加哌啶/DMF脫Fmoc，50℃反應(yīng)5 min，樹脂經(jīng)DMF洗滌后，加入含Meldrum酸、TES-H、DIPEA與Pd(PPh?)?Cl?的DMF溶液脫Alloc保護(hù)，多次洗滌樹脂并真空干燥。先后用DCM/HFIP軟切、TFA混合試劑深度切割肽鏈，乙醚沉淀粗肽，真空干燥后經(jīng)梯度乙腈水相HPLC純化得目標(biāo)肽中間體[2]。

參考文獻(xiàn)

[1] Nuijens, Timo; et al. A versatile and selective chemo-enzymatic synthesis of β-protected aspartic and γ-protected glutamic acid derivatives. Tetrahedron Letters (2009), 50(23), 2719-2721.

[2] Napier, Patrick; et al. Open-Flask Protocol for the Removal of Alloc Carbamate and Allyl Ester Protecting Groups. Application to In-solution and On-resin Peptide Synthesis. Journal of Organic Chemistry (2025), 90(1), 197-201.