背景技術(shù)
偏頭痛是世界范圍內(nèi)最常見的反復(fù)發(fā)作的神經(jīng)血管疾病，影響全球超過10億人口，其中僅美國即約有3900萬人，是全球<50歲人群致殘的最主要的病因之一。2016年全球疾病負(fù)擔(dān)研究組(Global Burden of Disease,GBD)將其列為全球第二大致殘性疾病，<50歲人群中排名第一。針對(duì)降鈣素基因相關(guān)肽受體拮抗藥(gepant)的CGRP單克隆抗體(mAbs)已被用于偏頭痛預(yù)防，并提供了一種有效的偏頭痛預(yù)防治療，但一些患者對(duì)mAbs的反應(yīng)不佳或有恐懼癥。阿托吉泮是用于治療偏頭痛的主要藥物，在海外已獲批（美國FDA），國內(nèi)尚在臨床/申報(bào)階段，暫未大范圍普及；國內(nèi)偏頭痛預(yù)防主流仍為氟桂利嗪、普萘洛爾、阿米替林等傳統(tǒng)藥物。
阿托吉泮是一種有效性，選擇性的口服小分子CGRP(降鈣素基因相關(guān)肽)受體拮抗劑，2021年9月美國食品藥品管理局(FDA)批準(zhǔn)美國艾伯維(AbbVie)生物制藥公司的atogepant(阿托吉泮)小分子口服片上市。CGRP是一種在大腦神經(jīng)系統(tǒng)周圍釋放的蛋白質(zhì)，廣泛分布于中樞、外周和其他系統(tǒng)中，參與神經(jīng)系統(tǒng)中疼痛傳遞的過程，引起大腦腦膜的強(qiáng)烈炎癥，偏頭痛發(fā)作期間，CGRP水平升高，而CGRP拮抗劑的作用是通過阻斷CGRP的傳遞方式來阻止偏頭痛。阿托吉泮作為小分子CGRP受體拮抗劑，能特異性抑制人類CGRP依賴性的顱內(nèi)動(dòng)脈血管舒張反應(yīng)，且不引起人類冠狀動(dòng)脈血管收縮，其優(yōu)點(diǎn)突出，從而使得其檢測(cè)方法的開發(fā)成為研發(fā)及分析人員的首要任務(wù)。
目前并沒有相關(guān)文獻(xiàn)涉及到阿托吉泮及有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)方法，現(xiàn)有產(chǎn)品質(zhì)量只是依靠定性手段來判別阿托吉泮，并沒有定量檢測(cè)阿托吉泮的方法，因此亟需開發(fā)相應(yīng)的檢測(cè)方法來達(dá)到分離及測(cè)定純度的目的，使得阿托吉泮及有關(guān)物質(zhì)的質(zhì)量處在可控范圍內(nèi)。
檢測(cè)方法[1]
檢測(cè)原料：實(shí)驗(yàn)室自制的阿托吉泮樣品及中間體。
供試品溶液1配制：分別精密稱取適量阿托吉泮中間體1，中間體2于同一容量瓶中，加入標(biāo)準(zhǔn)溶液溶解后定容，得到實(shí)驗(yàn)所需的混合溶液。
供試品溶液2的配制：精密稱取50.0mg的阿托吉泮粗品于100mL容量瓶中，加稀釋劑(乙腈：水(50：50)v/v)溶解后，定容至刻度線，即得(供試品溶液2濃度0.5mg/mL)。
采用以下檢測(cè)條件對(duì)供試品溶液1進(jìn)行檢測(cè)：
流動(dòng)相選擇：流動(dòng)相A為20mmol/L磷酸二氫銨水溶液，流動(dòng)相B為乙腈：甲醇＝50: 50；
兩種溶劑按一定比例對(duì)阿托吉泮進(jìn)行梯度洗脫，其洗脫梯度如下：
柱溫設(shè)定為30℃；流速設(shè)定為1.0mL/min；檢測(cè)波長設(shè)定為210nm；進(jìn)樣量設(shè)定為10μL；在上述條件下對(duì)阿托吉泮混合溶液進(jìn)行分析，獲得混合溶液的分離度結(jié)果，如圖所示。從譜圖上可以看出，阿托吉泮的相關(guān)物質(zhì)間分離度高，為5.65和13.33，出峰時(shí)間7.17min為中間體2峰，8.97min為中間體1峰，11.08min為主結(jié)構(gòu)峰，峰與峰之間的分離度均在5以上，而且出峰位置適中，峰形好，可以達(dá)到準(zhǔn)確分離檢測(cè)阿托吉泮及相關(guān)物質(zhì)的目的。
采用上述檢測(cè)條件對(duì)供試品溶液2進(jìn)行檢測(cè)，采用面積歸一化法對(duì)譜圖進(jìn)行積分，獲得阿托吉泮的純度為99.91％。
方法精密度試驗(yàn)(重復(fù)性試驗(yàn))：按供試品溶液2的配制過程精密稱取6份，分別用上述檢測(cè)條件進(jìn)樣，采用面積歸一化法對(duì)譜圖進(jìn)行積分，獲得阿托吉泮的純度結(jié)果，如表1所示。從表1可以看出，阿托吉泮的純度RSD值是0.004％，遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于2％，說明此方法的重復(fù) 性好。
參考文獻(xiàn)
[1] 濟(jì)南尚博醫(yī)藥股份有限公司. 一種阿托吉泮的檢測(cè)方法:CN202311735455.3[P]. 2025-06-17.