(S)-2-芴甲氧羰基氨基己二酸 6-叔丁酯是一種手性氨基酸類化合物，常溫常壓下為白色至類白色固體粉末，具有優(yōu)異的化學(xué)穩(wěn)定性和較好的熒光性質(zhì)，它不溶于水但是可溶于二甲基甲酰胺。(S)-2-芴甲氧羰基氨基己二酸 6-叔丁酯是一種手性藥物中間體，在以重組蛋白質(zhì)為主的基因工程藥物合成中有較好的應(yīng)用。

制備方法

圖1 (S)-2-芴甲氧羰基氨基己二酸 6-叔丁酯的制備方法

將裝有攪拌子的圓底燒瓶中加入交叉復(fù)分解產(chǎn)物、Pd/C（10 wt%）和乙醇，用氫氣球置換體系氣體30秒，隨后在正壓氫氣氛圍下反應(yīng)1小時。反應(yīng)液經(jīng)硅藻土過濾后減壓濃縮。為測定對映體過量值（ee值），將上述產(chǎn)物溶于2–5 mL甲醇/二氯甲烷混合溶劑中，于23 °C下用TMSCHN?（2.0 M乙醚溶液）處理5分鐘，隨后以乙酸淬滅并減壓濃縮，即可制得相應(yīng)的甲酯衍生物用于后續(xù)分析。按照上述通用操作，將Fmoc-3C-OBn（990 mg, 1.83 mmol）、Pd/C（99 mg, 10 wt%）和乙醇（35 mL）加入反應(yīng)體系，經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)條件及后處理，得產(chǎn)物(S)-2-芴甲氧羰基氨基己二酸 6-叔丁酯770 mg，收率96%。[1]

縮合反應(yīng)

圖2 (S)-2-芴甲氧羰基氨基己二酸 6-叔丁酯的縮合反應(yīng)

將(S)-2-芴甲氧羰基氨基己二酸 6-叔丁酯（88 mg, 0.216 mmol）溶于活化體系（HATU 82 mg, 0.216 mmol；DIEA 50 μL, 0.288 mmol），通過標(biāo)準(zhǔn)固相多肽合成（SPPS）程序偶聯(lián)至Rink酰胺樹脂（200 mg，載量為0.37 mmol/g）上，于固相合成反應(yīng)器中攪拌反應(yīng)2小時。隨后以DMF/Pip（80/20，v/v）溶液處理樹脂兩次，每次10分鐘，以脫除Fmoc保護基。將酯類化合物（88 mg, 0.216 mmol）溶于PyAOP（113 mg, 0.216 mmol）和DIEA（545 μL, 0.63 mmol）的活化體系中，偶聯(lián)至脫保護后暴露的氨基上，并于室溫下攪拌反應(yīng)過夜。偶聯(lián)完成后，依次用DMF洗滌樹脂三次、二氯甲烷洗滌三次。隨后以20 mL三氟乙酸（TFA）處理樹脂50分鐘，將目標(biāo)抑制劑從樹脂上裂解下來，將含產(chǎn)物的TFA濾液減壓蒸干，殘余物于乙醚中沉淀析出，過濾收集沉淀，經(jīng)制備型高效液相色譜純化，最后凍干得純品。[2]

參考文獻

[1] Ryan, Shannon J. et al, Convenient access to glutamic acid side chain homologs compatible with solid phase peptide synthesis， Organic Letters (2005), 7(21), 4765-4767.

[2] Impheng, Hathaichanok; et al, Peptide-based covalent inhibitor of tubulin detyrosination promotes mesenchymal-to-epithelial transition in lung cancer cells, Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America (2026), 123(1), e2514990123.