背景及概述[1]
平滑肌細胞又叫平滑肌纖維，系構成平滑肌的纖維狀長細胞。由于平滑肌所分布的部位不同，平滑肌細胞的長度很不一致，在小血管壁上的平滑肌細胞長度僅有20μm左右，妊娠期子宮壁平滑肌細胞可長達500μm，位于一般器官平滑肌細胞的長度約200μm左右，此細胞的寬度在7μm以內。平滑肌細胞多聚集成束，細胞輪廓不清，需用適當濃度的酸(堿)溶液將其分離，方可獲得外形完整的肌細胞。細胞內只有1個細胞核，呈橢圓形或長桿狀，位于細胞中段最寬的部分，長度與縱軸平行，核染色質為纖細網狀，可見2個以上核仁。在制作切片標本時，如肌細胞收縮則可變粗，核也隨之變粗，甚至可出現螺旋形的扭曲。平滑肌細胞的胞質通常稱為肌漿。生活狀態(tài)下的胞質呈均質性，一般染色切片上不顯任何結構。應用特殊染色或用三氯醋酸溶液稍加浸泡，可在胞質內顯出縱列的細絲，稱肌原纖維。平滑肌細胞外面包有1層肌膜。每個平滑肌細胞周圍有少量纖細的膠質纖維、彈力纖維及網狀纖維，包繞于肌膜的表面。平滑肌細胞可隨環(huán)境的改變伸長或縮短，有很大的彈性和韌力。
大鼠支氣管平滑肌細胞分離自支氣管組織；支氣管（Bronchi），是指由支氣管分出的各級分枝，由支氣管分出的一級支氣管，即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較，前者較細長，走向傾斜；后者較粗短，走向較前者略直，所以經支氣管墮入的異物多進入右主支氣管。支氣管和支氣管還有以區(qū)別就是，支氣管是以“C”型的支氣管軟骨為支架，而支氣管不是。大鼠支氣管平滑肌細胞主要功能：①大鼠支氣管平滑肌細胞能維持支氣管張力，保持支氣管形態(tài)；②大鼠支氣管平滑肌特異的超微結構特點和調節(jié)機制是支氣管正常生理功能的基礎；③大鼠支氣管平滑肌通過分泌細胞因子和趨化因子等促炎介質，發(fā)揮免疫調節(jié)功能。支氣管平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。大鼠支氣管平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經alpha-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
相關研究[2-3]
有研究觀察一氧化氮(NO)供體硝普鈉(SNP)是否誘導大鼠支氣管平滑肌細胞(ASMCs)凋亡。方法Wistar大鼠10只，用卵白蛋白作為致敏原建立大鼠哮喘模型，分離出大鼠的氣道平滑肌細胞，用SNP(NO的供體)干預，通過四甲基偶氮唑藍(MTT)法測定細胞生長率的變化，用原位末端標記法和流式細胞術檢測SNP對哮喘大鼠氣道平滑肌細胞細胞凋亡的影響。結果⑴MTT法測定：SNP+哮喘組的細胞抑制率明顯高于哮喘組細胞存活率，(n=8，P<0.05)，且呈濃度依賴關系。⑵TUNEL(原位末端標記)法檢測：SNP+哮喘組的凋亡指數明顯高于哮喘組，(n=4，P<0.05)。⑶流式細胞術測定SNP+哮喘組的平滑肌細胞凋亡率明顯高于哮喘組，(n=4，P<0.05)。結論為硝普鈉能抑制大鼠支氣管平滑肌細胞的增殖，并且能誘導哮喘大鼠氣道平滑肌細胞的凋亡，這種作用可能與治療哮喘的氣道重建有關。
有研究觀察射麻止喘湯對支氣管哮喘大鼠氣道平滑肌細胞(ASMC)增殖的影響。選用SPF級SD大鼠分為哮喘組和正常對照組，哮喘組采用卵清蛋白(OVA)致敏并激發(fā)方法復制哮喘模型，造模成功后分別取各組支氣管平滑肌進行細胞培養(yǎng)，倒置顯微鏡觀察形態(tài)并經免疫熒光染色鑒定；給予大鼠灌胃高、中、低劑量的射麻止喘湯(劑量分別為64、32、6.4g.kg-1.d-1)制備含藥血清；取2～5代ASMC分別給予射麻止喘湯高、中、低劑量含藥血清，蛋白激酶C(PKC)激活劑佛波醇-12-肉豆蔻酰-13-乙酸佛波酯(PMA，10nmol/L)，PKC抑制劑馬來酰亞胺甲磺酸鹽(Ro-31-8220，5μmol/L)干預；另設空白組(不給予任何藥物血清干預)。采用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測各組ASMC增殖(D值)。結果顯示免疫熒光染色鑒定結果顯示所培養(yǎng)的細胞為平滑肌細胞。正常大鼠PMA組ASMC的D值較空白組顯著增高(P<0.05)，Ro-31-8220組、射麻止喘湯各劑量組D值與空白組比較差異均無顯著性意義(P>0.05)。哮喘模型大鼠PMA組ASMC的D值較空白組顯著增加(P<0.05)，Ro-31-8220組、射麻止喘湯各劑量組D值均較空白組顯著降低(P<0.05)，但射麻止喘湯各劑量組與Ro-31-8220組比較差異無顯著性意義(P>0.05)。因此射麻止喘湯治療支氣管哮喘的作用可能與其能抑制ASMC增殖，影響哮喘的氣道重塑過程有關。
主要參考資料
[1] 新編實用醫(yī)學詞典
[2] 硝普鈉誘導體外哮喘大鼠支氣管平滑肌細胞凋亡
[3] 射麻止喘湯對哮喘大鼠支氣管平滑肌細胞增殖的影響