蘋果銹果類病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒
商品屬性
產品名稱 | 蘋果銹果類病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 英文名稱 | Apple Scar Skin Viroid (ASSVd) Dye-based Quantitative Real-time RT-PCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR2667 |
產品特點
即開即用：用戶僅需提供樣品RNA模板，操作簡便。
高靈敏度：引物及探針經優(yōu)化設計，可檢測低拷貝數目標序列。
高特異性：針對蘋果銹果類病毒高度保守區(qū)設計引物，避免與其他病毒RNA交叉反應。
內置對照：提供陽性對照（1×10^8拷貝/μL），便于區(qū)分假陰性結果。
兼容性：適用于染料法熒光定量RT-PCR，線性范圍覆蓋5個數量級。
試劑盒組成
5×雙酶一管式RT-PCR Buffer：200μL/管
MMLV-Taq Mix：75μL/管
超純水：1mL/管
蘋果銹果類病毒引物混合液：100μL/管
陽性對照（非活體DNA片段）：50μL（1×10^8拷貝/μL）
核酸釋放劑：1mL（20次用量）
使用手冊：1份
實驗操作流程
樣品制備
建議設置N+2個提取反應（N為待測樣品數，另加陽性對照PC和陰性對照NC）。
陰性對照：超純水；陽性對照：試劑盒提供DNA片段稀釋至與樣品體積一致。
使用兼容的RNA提取試劑盒純化樣品。
RT-PCR反應
反應體系：20μL（含模板RNA、引物、緩沖液、酶混合液等）。
反應程序：按說明書建議設置逆轉錄（50℃ 30min）、預變性（95℃ 10min）、擴增循環(huán)（95℃ 15s → 60℃ 60s，40循環(huán)）。
結果分析
定性檢測：取5-10μL產物進行1.5%-2.0%瓊脂糖凝膠電泳，觀察特異性條帶。
定量檢測：通過熒光定量PCR儀分析Ct值，標準曲線法計算病毒拷貝數。
注意事項
避免反復凍融試劑，分裝后使用。
實驗廢棄物需按生物安全規(guī)范處理，防止污染。
陽性對照為DNA片段，不可用于活病毒實驗。
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關鍵字： 蘋果銹果類病毒;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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