鯉浮腫病毒染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 鯉浮腫病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Carp Edema Virus Dye-based Quantitative Real-time PCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR2683 |
產(chǎn)品基本信息
保存條件:-20℃避光保存,有效期12個月,反復凍融不超過5次。
檢測方法:TaqMan探針法實時熒光PCR技術(shù)。
適用儀器:ABI7500、安捷倫MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf等熒光定量PCR儀。
檢驗原理
試劑盒基于鯉浮腫病毒特異性基因序列設計引物和熒光探針,通過實時熒光PCR技術(shù)對病毒核酸進行體外擴增檢測。探針在擴增過程中被Taq酶水解,釋放熒光信號(FAM通道),通過Ct值定量分析病毒載量。
試劑組成
| 組分 | 25T/盒規(guī)格 | 50T/盒規(guī)格 |
| 反應液 | 500μL×1管 | 500μL×2管 |
| 酶液 | 25μL×1管 | 50μL×1管 |
| 陽性質(zhì)控品 | 250μL×1管 | 250μL×1管 |
| 陰性質(zhì)控品 | 250μL×1管 | 250μL×1管 |
注意:不同批號組分不可混用。
操作步驟
樣本處理(樣本處理區(qū))
使用磁珠法或離心柱法提取核酸,建議配套專用核酸提取試劑。
試劑配制(試劑準備區(qū))
反應體系(20μL/管):
反應液:19μL
酶液:1μL
分裝后加入5μL待測核酸或陰陽性質(zhì)控品。
PCR擴增
按儀器說明書設置程序:
預變性:95℃ 2分鐘
擴增:95℃ 15秒 → 60℃ 60秒(45個循環(huán),F(xiàn)AM通道采集信號)。
質(zhì)量控制
陽性對照:Ct值≤35且呈典型S型擴增曲線。
陰性對照:無Ct值或Ct值≥40。
注意事項
實驗分區(qū)操作,避免交叉污染。
試劑解凍后需徹底混勻并短暫離心。
臨床診斷需結(jié)合其他檢測方法綜合判定。
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關鍵字: 鯉浮腫病毒;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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