檢驗原理

本試劑盒采用SYBR Green染料法實時熒光定量PCR技術(shù),針對錦鯉皰疹病毒Sph基因的高度保守區(qū)域設計特異性引物。在PCR擴增過程中,SYBR Green染料與雙鏈DNA結(jié)合后釋放熒光信號,通過實時監(jiān)測熒光強度變化,實現(xiàn)對KHV核酸的定性及定量檢測。
產(chǎn)品名稱 | 錦鯉皰疹病毒Sph基因染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Koi Herpesvirus Sph Gene Dye-based Quantitative Real-time PCR Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測類型 | PCR檢測 | 產(chǎn)品貨號 | PR3061 |

試劑盒組成

PCR預混液(MagicMix 3.0):含Taq DNA聚合酶、dNTPs、緩沖液及SYBR Green染料(1 mL,紅蓋)。
超純水:無核酸酶污染(1 mL,亮黃色蓋)。
Sph基因特異性引物混合液:優(yōu)化設計的正向/反向引物(100 μL,白蓋)。
陽性對照:含1×10^8拷貝/μL的KHV Sph基因片段(50 μL,黃蓋)。
核酸釋放劑(試用裝):用于樣本前處理(1 mL,綠蓋,20次用量)。
使用說明書:1份。
運輸與儲存
低溫運輸(-20℃避光),-20℃保存,有效期12個月。
陽性對照需單獨存放,避免污染其他組分。
操作步驟

反應體系配制(建議冰上操作):
每40μL反應體系包含:
PCR預混液 20μL
引物混合液 2μL
待測DNA模板 5μL
超純水補足至40μL。
陽性對照:以5μL陽性對照替代待測模板。
擴增程序(以主流qPCR儀為例):
預變性:95℃ 3分鐘;
循環(huán)階段(40 cycles):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集熒光信號)。
結(jié)果判讀:
陰性:無擴增曲線或Ct值≥40;
陽性:出現(xiàn)典型S型擴增曲線且Ct值在預期范圍內(nèi)(需與陽性對照比對)。
注意事項

本產(chǎn)品僅限科研使用,不可用于臨床診斷。
操作需在無菌環(huán)境下進行,避免交叉污染。
建議重復檢測3次以提高準確性。
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關鍵字: 錦鯉皰疹病毒Sph基因;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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