錦鯉皰疹病毒染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 錦鯉皰疹病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Koi Herpesvirus (KHV) Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR3469 |
檢驗原理
本試劑盒基于SYBR Green染料法實時熒光定量PCR技術(shù)，針對錦鯉皰疹病毒Sph基因（KHV）高度保守區(qū)域設(shè)計特異性引物。在PCR擴增過程中，SYBR Green染料與雙鏈DNA結(jié)合釋放熒光信號，通過儀器實時監(jiān)測熒光強度變化，實現(xiàn)對KHV核酸的定性和定量分析。
試劑盒組成
PCR MagicMix 3.0（含Taq酶、dNTPs、緩沖液及SYBR Green染料）——1 mL
超純水（無核酸酶）——1 mL
KHV Sph基因特異性引物混合液——100 μL
KHV陽性對照（1×10^8拷貝/μL）——50 μL
核酸釋放劑（試用裝）——1 mL（20次用量）
使用手冊——1份
儲存與運輸
儲存條件：-20℃避光保存，有效期12個月；陽性對照需單獨存放，避免污染。
運輸條件：低溫運輸（冰袋或干冰）。
操作步驟
樣本處理：使用核酸釋放劑提取待測樣本DNA。
反應(yīng)體系配置（40μL/反應(yīng)）：
PCR MagicMix 3.0：20 μL
引物混合液：2 μL
DNA模板：5 μL
超純水：補足至40 μL
（陽性對照需單獨設(shè)置反應(yīng)管）
擴增程序（以主流qPCR儀為例）：
預(yù)變性：95℃ 5分鐘
循環(huán)階段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號）
結(jié)果判讀：
陽性：Ct值≤35，且擴增曲線呈典型S型。
陰性：無擴增曲線或Ct值≥40。
注意事項
本產(chǎn)品僅限科研使用，不可用于臨床診斷。
操作需在無菌環(huán)境下進行，避免交叉污染。
試劑解凍后需充分混勻，避免反復(fù)凍融。
實驗需設(shè)置陰性對照（超純水替代模板）和陽性對照。
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