本試劑盒基于特異性PCR擴(kuò)增技術(shù)，靶向洋蔥伯克氏菌保守基因序列，可精準(zhǔn)檢測(cè)植物組織、土壤、水體、養(yǎng)殖環(huán)境樣本中的病原菌核酸。洋蔥伯克氏菌可引發(fā)作物病害，同時(shí)存在人畜感染風(fēng)險(xiǎn)，試劑盒抗環(huán)境雜質(zhì)干擾能力強(qiáng)，檢測(cè)結(jié)果穩(wěn)定。適用于農(nóng)業(yè)作物病害溯源、種植基地病原監(jiān)測(cè)、環(huán)境菌群篩查及該菌種相關(guān)科研檢測(cè)工作。
產(chǎn)品名稱 | 洋蔥伯克氏菌PCR檢測(cè)試劑盒 | 貨號(hào) | YS-P013967 |
英文名稱 | Burkholderia cepaciaPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個(gè)月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
qPCR 靶向洋蔥伯克氏菌特異性 recA 基因，檢測(cè)植物根際、植株組織致病菌 DNA。
普通 PCR 擴(kuò)增細(xì)菌 16S-23S rRNA 間隔特異序列，電泳鑒定該植物致病菌。
土壤樣本細(xì)菌 DNA 富集后巢式 PCR，克服土壤腐殖酸抑制擴(kuò)增的問(wèn)題。
?操作步驟?：
RNA提?。菏褂门涮自噭┗蛏虡I(yè)試劑盒提取樣品RNA。
反應(yīng)配制：按說(shuō)明書比例混合預(yù)混液、引物探針、模板RNA及對(duì)照。
PCR擴(kuò)增：
預(yù)變性：95℃ 2分鐘；
循環(huán)：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40個(gè)循環(huán)），于FAM通道采集信號(hào)。
結(jié)果分析：通過(guò)Ct值判定病毒含量，陽(yáng)性對(duì)照需出現(xiàn)典型擴(kuò)增曲線，陰性對(duì)照無(wú)信號(hào)。
?注意事項(xiàng)?：
試劑禁止反復(fù)凍融，分裝為小體積 - 20℃保存，融化后冰上放置不超過(guò) 2 h
所有耗材必須無(wú) DNase/RNase，吸頭一次性使用，廢液、廢棄 PCR 管 121℃高壓滅菌后丟棄
陽(yáng)性質(zhì)粒高拷貝，開(kāi)蓋全程在生物安全柜操作，防止氣溶膠污染實(shí)驗(yàn)室
試劑盒僅限科研檢測(cè)，禁止人、臨床樣本檢測(cè)
試劑盒過(guò)期、試劑渾濁、變色禁止使用
若大量樣本出現(xiàn)陰性對(duì)照帶污染，立即更換全新試劑盒，徹底紫外消毒實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、移液器
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