本試劑盒專為鼻疽伯克霍爾德氏菌檢測研發(fā)，采用熒光PCR技術(shù)靶向菌種特征核酸序列，可精準檢測畜禽病變組織、分泌物、環(huán)境樣本中的病原菌。該病菌是引發(fā)動物鼻疽病的烈性人獸共患病原，致病性強、危害大，試劑盒特異性高，可快速區(qū)分伯克霍爾德氏菌其他菌種。適用于畜禽鼻疽病確診、疫區(qū)排查、養(yǎng)殖環(huán)境消殺效果驗證及公共衛(wèi)生安全檢測。
產(chǎn)品名稱 | 鼻疽伯克霍爾德氏菌PCR檢測試劑盒 | 貨號 | YS-P013968 |
英文名稱 | Burkholderia malleiPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
熒光 qPCR 靶向鼻疽伯克霍爾德菌毒力 BurP 基因，特異性探針僅識別該致病菌種。
普通 PCR 擴增細菌特有鞭毛蛋白基因，電泳區(qū)分類鼻疽伯克菌。
動物臟器病料裂解直擴 PCR，快速篩查馬屬動物鼻疽致病菌。
?操作步驟?：
樣本處理（樣本處理區(qū)）
推薦使用磁珠法或離心柱法提取核酸，避免交叉污染。
試劑配制（試劑準備區(qū)）
反應體系（20μL/管）：19μL反應液 + 1μL酶液，分裝后加入5μL待測核酸或質(zhì)控品。
PCR擴增（核酸擴增區(qū)）
循環(huán)參數(shù)：
預變性：95℃ 2min（1循環(huán)）；
擴增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循環(huán)，60℃時采集熒光信號，F(xiàn)AM通道）。
結(jié)果分析
陽性：Ct值≤40，擴增曲線呈指數(shù)增長；
陰性：無Ct值或曲線平直；
可疑：40<Ct≤45，需復測確認。
質(zhì)控要求：陽性質(zhì)控Ct≤32，陰性質(zhì)控無擴增。
?注意事項?：
所有試劑避免反復凍融，可分裝小體積凍存；融化后冰上放置不超過 2 h，酶失活會直接導致無擴增條帶
陽性質(zhì)?？截悢?shù)極高，開蓋全程在生物安全柜操作，防止氣溶膠污染實驗室
所有耗材必須無核酸酶，槍頭一次性使用；實驗后 PCR 管、廢液 121℃高壓滅菌后丟棄
試劑盒出現(xiàn)渾濁、變色、結(jié)冰分層、過期禁止使用
僅限科研檢測，嚴禁用于人體臨床疾病診斷、食品出廠檢疫等合規(guī)檢測場景
土壤、糞便、腐殖質(zhì)樣本優(yōu)先使用磁珠法提取核酸，減少抑制劑干擾
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關(guān)鍵字： 鼻疽伯克霍爾德氏菌;PCR檢測試劑盒;
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