雙抗體夾心 ELISA 體系，固相微孔板固定抗大鼠 IL1Ra 捕獲抗體，樣本 IL1Ra 拮抗蛋白特異性結(jié)合固相抗體，洗板去除雜蛋白后加入 HRP 標(biāo)記抗 IL1Ra 檢測(cè)抗體形成夾心免疫復(fù)合物，底物顯色讀數(shù)，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線定量 IL1Ra 含量。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E1095 |
英文名稱 | IL-1ra ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測(cè)靈敏度≤1pg/mL
檢測(cè)范圍：2pg/mL - 210pg/mL
反應(yīng)時(shí)間：孵育120分鐘，二抗反應(yīng)60分鐘，避光顯色15分鐘
保存條件：2-8℃避光冷藏，試劑密封存放，防止揮發(fā)、污染
有效期：原裝未拆封有效期6個(gè)月
顯色系統(tǒng)：TMB底物顯色體系，硫酸終止液終止顯色
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm檢測(cè)吸光度
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：梯度稀釋IL1Ra標(biāo)準(zhǔn)品，檢測(cè)OD值，四參數(shù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算樣本濃度
特異性：特異性結(jié)合大鼠IL1Ra，與IL-1α、IL-1β及其他拮抗劑蛋白無(wú)交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤6%，板間CV≤8%
注意事項(xiàng)：1. 樣本避免反復(fù)凍融，保證蛋白活性；2. 洗板徹底，降低本底誤差；3. 恒溫孵育，保證反應(yīng)穩(wěn)定性；4. 不同批次試劑禁止混用。
儲(chǔ)存與有效期：
未開(kāi)封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個(gè)月。
開(kāi)封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個(gè)月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個(gè)月內(nèi)使用。
過(guò)期試劑禁止使用。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑平衡：全部試劑室溫放置 28min，濃縮洗滌液 1:20 稀釋混勻備用。
標(biāo)準(zhǔn)品配制：IL1Ra 凍干標(biāo)準(zhǔn)品充分溶解，梯度稀釋 7 個(gè)濃度梯度。
加樣：標(biāo)準(zhǔn)孔 50μL 標(biāo)準(zhǔn)品，炎癥組織勻漿、細(xì)胞上清 50μL 加入檢測(cè)孔。
酶抗體孵育：每孔 50μL HRP-IL1Ra 抗體，密封 37℃避光孵育 65min。
洗板：洗滌液浸泡 36s，拍干，洗板 6 次。
顯色：底物 A、B 各 50μL，避光 37℃顯色 18min。
終止讀數(shù)：終止液搖勻，9min 內(nèi) 450nm 檢測(cè)，計(jì)算 IL1Ra 含量。
關(guān)鍵字： 大鼠白介素1受體拮抗劑;IL1Ra;ELISA試劑盒;
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