本試劑盒基于競爭法酶聯(lián)免疫吸附檢測原理，微孔板預先包被大鼠NN-T4抗原，檢測時向孔中加入待測樣本、標準品及特異性一抗，樣本中的NN-T4抗原與微孔板上包被的固相抗原競爭結合有限的抗體結合位點，孵育平衡后洗滌去除未結合物質，隨后加入酶標記二抗孵育結合，再次洗滌后加入底物液顯色，酶促反應產生的有色產物吸光度與樣本中NN-T4含量呈負相關，終止顯色后通過酶標儀讀取OD值，對照標準曲線即可定量檢測大鼠樣本中新生甲狀腺素的含量。
基本參數(shù)?：

產品名稱：大鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒

英文名稱：NN-T4 ELISA Kit
貨號：Y-E1622

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低檢測靈敏度≤0.05μg/dL，可精準捕捉新生大鼠微量甲狀腺素表達水平

檢測范圍：0.1μg/dL - 20μg/dL，適配新生大鼠血清、臍帶血樣本檢測需求

反應時間：全流程反應耗時100分鐘，分兩次溫育，分步完成抗原抗體結合反應

保存條件：所有試劑組分2-8℃避光冷藏，濃縮洗滌液低溫靜置若出現(xiàn)結晶，溫水溶解后可正常使用

有效期：原裝未開封試劑盒有效期6個月，開封后建議1個月內用完，避免試劑失效

特異性：專一性結合大鼠新生型T4，與成熟T4、三碘甲狀腺原氨酸（T3）無交叉反應

重復性：板內變異系數(shù)≤7%，板間變異系數(shù)≤9%，批次間實驗數(shù)據(jù)一致性良好

注意事項：新生大鼠樣本采集后需快速分離血清，避免激素降解；顯色液需現(xiàn)用現(xiàn)取，禁止長期暴露在光照環(huán)境中，不同批次試劑不混用。
關鍵注意事項：

實驗前需仔細閱讀對應試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異

所有試劑需按要求儲存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）

避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用

洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽性結果

顯色過程需避光，避免陽光直射影響結果
實驗步驟如下：

取出試劑盒所有組分室溫放置 25min，取出可拆式酶標條，按需拆分使用，標記組別區(qū)分空白、標品、樣品孔。

標準品用配套稀釋液倍比稀釋，配制系列濃度標準溶液，標準孔加 60μL 標品稀釋液，待測孔添加 60μL 大鼠血漿樣本，空白孔加稀釋液補齊體積。

配制酶標記抗體工作液，每孔添加 120μL 酶工作液，覆膜封板，37℃水浴環(huán)境避光孵育 70min。

手動洗板，每孔注滿洗滌液浸泡 40s，倒扣拍干廢液，循環(huán)洗板 6 次，徹底去除非特異性結合雜質。

按比例混合顯色底物液，每孔添加 100μL 混合顯色液，避光室溫顯色 20min。

加入終止緩沖液 60μL 終止酶促顯色，橫向輕搖微孔板保證孔內體系混勻。

酶標儀 450nm 測定吸光值，擬合標準曲線換算樣本中 NN-T4 具體含量。
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