本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理，微孔板內(nèi)固定有小鼠α羥基丁酸脫氫酶（αHBDH）特異性捕獲抗體。檢測(cè)過程中，樣本、標(biāo)準(zhǔn)品中的αHBDH抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗滌去除游離雜質(zhì)成分后，加入HRP標(biāo)記的配對(duì)檢測(cè)抗體，形成固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物。經(jīng)充分洗滌后加入TMB底物顯色，酶促反應(yīng)產(chǎn)生的顯色產(chǎn)物濃度與樣本中αHBDH含量成正比，終止反應(yīng)后檢測(cè)吸光度，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線即可定量檢測(cè)樣本中小鼠α羥基丁酸脫氫酶的含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：小鼠α羥基丁酸脫氫酶(αHBDH)ELISA試劑盒
英文名稱：αHBDH ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E2259
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最小檢出 0.18U/L
檢測(cè)范圍：0.4U/L～60U/L
反應(yīng)時(shí)間：37℃孵育樣本 110min，酶標(biāo)二抗 62min，顯色 26min，終止讀數(shù)，總時(shí)長(zhǎng) 198min
保存條件：試劑盒 2～8℃冷藏；稀釋后的工作液當(dāng)天配制當(dāng)天使用，不可留存次日
顯色系統(tǒng)：A+B 雙組份 TMB 臨用混合顯色
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm 參考 650nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：八點(diǎn)梯度標(biāo)準(zhǔn)品，非線性擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線
注意事項(xiàng)：溶血樣本會(huì)釋放胞內(nèi)酶，造成檢測(cè)結(jié)果假性偏高；設(shè)置空白對(duì)照孔扣除本底。
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
本試劑盒僅科研體外檢測(cè)，嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會(huì)降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會(huì)造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會(huì)漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運(yùn)輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
試劑盒室溫放置 28min 平衡組分溫度，稀釋洗滌液，梯度稀釋 αHBDH 標(biāo)準(zhǔn)品。
酶標(biāo)板布設(shè)標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)小鼠體液樣本孔、空白孔，依次加樣。
直接添加酶標(biāo)記結(jié)合液，封板密封，37℃孵育 68min。
棄凈孔內(nèi)液體，洗板 5 次，浸泡 30s / 次，徹底拍干。
避光加入顯色液，顯色 15min。
加入終止液終止催化反應(yīng)，搖晃混勻。
測(cè)定吸光度值，標(biāo)準(zhǔn)曲線定量 αHBDH 含量。
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關(guān)鍵字： 小鼠α羥基丁酸脫氫酶;αHBDH;ELISA試劑盒;
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