本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測原理，微孔板固相固定有小鼠鑰孔蟲戚血藍蛋白（KLH）特異性抗體。檢測時，樣本、標準品中的KLH抗原與固相捕獲抗體特異性結(jié)合，洗去游離雜質(zhì)后，加入HRP標記的KLH檢測抗體，形成完整的固相抗體-抗原-酶標抗體免疫復合物。充分洗滌后加入TMB底物啟動顯色反應，顯色強度與樣本中KLH蛋白含量正相關(guān)，終止反應后測定吸光度，依據(jù)標準曲線即可精準計算樣本中目標蛋白的含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：小鼠鑰孔蟲戚血藍蛋白(KLH)ELISA試劑盒
英文名稱：KLH ELISA Kit
貨號：Y-E2050
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢出 0.17ng/mL
檢測范圍：0.35ng/mL～19ng/mL
反應時間：室溫孵育 90min，酶標記物 54min，顯色 20min，終止后立即檢測，合計 164min
保存條件：試劑盒 2～8℃避光；KLH 標準品 - 20℃凍存，避免蛋白變性
顯色系統(tǒng)：雙組份 TMB 臨用混合顯色
檢測波長：450nm+620nm
標準曲線繪制：七組倍比稀釋標準品，半對數(shù)擬合標準曲線
注意事項：免疫后小鼠血清避免高溫滅活；洗板次數(shù)不少于 6 次降低背景值。
關(guān)鍵注意事項：
實驗前需仔細閱讀對應試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光，避免陽光直射影響結(jié)果
實驗步驟如下：
試劑盒室溫回溫 30min，稀釋洗滌工作液，梯度稀釋 KLH 標準抗原溶液。
酶標板依次加樣標準品、免疫后小鼠血清樣本、陰性對照孔。
直接添加酶標記二抗，封板 37℃孵育 57min。
洗板 4 次，浸泡 31s / 次，拍干微孔殘液。
遮光顯色底物反應 15min。
加入終止液終止反應，混勻體系。
酶標儀讀數(shù)，計算抗 KLH 抗體含量。
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