HRP標記的JOSD2蛋白抗體
原理特點
本抗體偶聯(lián)辣根過氧化物酶(HRP),通過HRP催化底物發(fā)生氧化顯色或化學(xué)發(fā)光反應(yīng)實現(xiàn)信號檢測,具備靈敏度高、反應(yīng)速度快、成本低的特點??贵w特異性識別JOSD2去泛素化蛋白,該蛋白參與細胞蛋白穩(wěn)態(tài)調(diào)控、基因轉(zhuǎn)錄修飾及細胞周期調(diào)節(jié),在腫瘤發(fā)生、細胞應(yīng)激反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。該抗體適配Western Blot、ELISA、免疫組化等常規(guī)分子實驗,可高效檢測細胞與組織中JOSD2的內(nèi)源性表達水平,實驗重復(fù)性極佳。
英文名稱:Josephin-2 Rabbit pAb, HRP conjugated
中文名稱:HRP標記的JOSD2蛋白抗體
英文別名:FLJ29018; JOS2_HUMAN; JOSD 2; JOSD2; Josephin 2; Josephin domain containing 2; Josephin domain containing protein 2; Josephin domain-containing protein 2; Josephin-2; Josephin2; SBBI54.
標記物:HRP 辣根過氧化物酶,最常用酶促顯色標記(ECL 化學(xué)發(fā)光、DAB 顯色)
靶蛋白:JOSD2(Josephin 結(jié)構(gòu)域去泛素化酶,分子量~21kDa)
抗體類型:兔多克隆,抗原親和純化
種屬:人、小鼠、大鼠
應(yīng)用:WB 直接化學(xué)發(fā)光、ELISA、IHC 顯色
蛋白功能:調(diào)控蛋白去泛素化、細胞周期、腫瘤增殖、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)穩(wěn)態(tài)調(diào)控
優(yōu)勢:HRP 一抗省去二抗孵育步驟,縮短 WB 實驗流程
靶點背景
1. JOSD2 屬于去泛素化酶家族,介導(dǎo)靶蛋白泛素鏈去除,調(diào)控蛋白質(zhì)穩(wěn)定性
2. 參與細胞周期調(diào)控、代謝穩(wěn)態(tài)、DNA 損傷修復(fù),異常表達關(guān)聯(lián)腫瘤發(fā)生發(fā)展
3. WB、IHC 常用,探究泛素化修飾調(diào)控通路、腫瘤預(yù)后分子機制
實驗操作過程注意事項
抗體稀釋
使用專用抗體稀釋液或含BSA的緩沖液稀釋抗體,避免用純水稀釋(純水中無鹽分會導(dǎo)致抗體變性);
嚴格按照說明書的建議稀釋比例進行稀釋,若說明書未提供,可通過預(yù)實驗確定最佳稀釋比例(通常1:500-1:10000);
稀釋后的抗體需一次性用完,未用完的部分不可再次凍存。
抗體孵育
一抗孵育:通常4℃孵育過夜,可減少非特異性結(jié)合,避免室溫孵育時間過長導(dǎo)致抗體變性;
二抗孵育:室溫孵育1-2小時,孵育期間需避光(熒光二抗);
孵育時需保證抗體均勻覆蓋樣本表面,避免產(chǎn)生氣泡;
實驗過程中使用封閉液(如5%BSA或脫脂牛奶)封閉非特異性結(jié)合位點,減少背景信號。
洗滌步驟
每步孵育后,需用PBST或TBST洗滌3-5次,每次5分鐘,徹底去除未結(jié)合的抗體;
洗滌時需輕輕晃動培養(yǎng)板或載玻片,避免用力過猛導(dǎo)致樣本脫落;
洗滌液需新鮮配制,避免使用過期或變質(zhì)的洗滌液。
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關(guān)鍵字: HRP標記的JOSD2蛋白抗體;Josephin-2 Rabbit pA;100ul;
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