本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測原理，酶標板微孔包被大鼠LHRH特異性抗體，樣本中的黃體生成素釋放激素抗原與包被抗體特異性結(jié)合，結(jié)合酶標記二抗后顯色，吸光度與樣本LHRH濃度正相關，可精準定量檢測其含量水平。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：最低檢測濃度≤0.05ng/mL

檢測范圍：0.1ng/mL～8ng/mL

反應時間：總時長110min，孵育80min，顯色20min，讀數(shù)5min

保存條件：2～8℃避光冷藏，激素試劑單獨存放，避免交叉污染

有效期：未開封6個月，開封后1個月內(nèi)用完

顯色系統(tǒng)：激素專用高靈敏TMB顯色系統(tǒng)

檢測波長：450nm主波長檢測

標準曲線繪制：梯度標準品檢測，四參數(shù)擬合，R2≥0.992

特異性：特異性識別大鼠LHRH，與促性腺激素、其他下丘腦激素無交叉反應

重復性：板內(nèi)CV≤7%，板間CV≤9%

注意事項：下丘腦、血清樣本需低溫采集保存；避免反復凍融導致激素降解；孵育濕度100%，防止干孔。
通用注意事項：

樣本要求

血清、血漿避免嚴重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復凍融≥3 次會導致抗原降解，檢測值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴格 37℃，溫箱溫度波動、室溫過低會降低結(jié)合效率，背景升高、重復性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會造成高背景、假陽性；拍干時使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實驗耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標準品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實驗廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標準品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實驗。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標準孔時，必須稀釋重測，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測限標注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對照

空白孔吸光度應極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實驗作廢重做。

儲存禁忌

試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會造成酶標抗體蛋白變性，直接導致試劑盒完全失效。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實驗操作流程：

試劑盒室溫放置 36min，倍比稀釋 LHRH 多肽標準品，排布酶標板空白對照、標準、大鼠下丘腦勻漿樣本孔。

直接向?qū)准尤霕藴势?、稀釋下丘腦上清樣本各 100μL，空白孔補樣本稀釋緩沖液。

封板封口，37℃孵育 85min，特異性結(jié)合釋放激素 LHRH。

倒掉孔內(nèi)廢液，洗滌液浸泡每孔 43s，連續(xù)洗板 6 次，洗脫雜蛋白干擾。

非空白孔加入酶標記二抗工作液 100μL，避光 37℃孵育 38min。

依次添加顯色 A 液、B 液各 50μL，混勻避光顯色 20min。

加入終止液終止顯色，酶標儀 450nm 讀數(shù)，依據(jù)標準曲線得出 LHRH 含量。