本試劑盒依托雙抗體夾心酶聯(lián)免疫檢測原理，酶標板包被有大鼠MMP-8特異性捕獲抗體，可特異性結合樣本中的MMP-8抗原。經(jīng)過樣本孵育、洗板去除非特異性結合雜質(zhì)后，加入辣根過氧化物酶標記的檢測抗體，構建完整的免疫夾心結構。底物催化顯色后終止反應，吸光度數(shù)值與樣本中MMP-8含量呈正相關，通過標準曲線換算，可定量檢測大鼠樣本中MMP-8的含量。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細胞膠原酶(MMP-8)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1512 |
英文名稱 | MMP-8 ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測濃度≤0.09ng/mL
檢測范圍：0.18ng/mL - 9.5ng/mL
反應時間：總反應時長125min（樣本孵育65min、酶孵育30min、顯色30min）
保存條件：2-8℃避光保存，標準品復溶后短期4℃保存，長期-20℃凍存
有效期：原裝試劑盒12個月
顯色系統(tǒng)：TMB-H2O2顯色系統(tǒng)，酸性終止液終止
檢測波長：450nm
標準曲線繪制：6個濃度梯度標準品檢測，四參數(shù)Logistic擬合標準曲線
特異性：特異性結合大鼠MMP-8，不與中性粒細胞相關同源酶類交叉反應
重復性：板內(nèi)CV≤8%，板間CV≤10%
注意事項：血液樣本需充分離心分離上清，避免血細胞干擾檢測結果
試劑盒組成：
預包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結合目標物
標準品 6支/套 制備標準曲線，定量檢測依據(jù)
生物素標記抗體/抗原 1瓶 識別并結合目標物，提供酶結合位點
辣根過氧化物酶（HRP）標記親和素 1瓶 與生物素結合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應，穩(wěn)定顯色結果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
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實驗操作流程：
所有試劑室溫平衡 35min，配比洗滌工作液，復溶并梯度稀釋 MMP-8 標準品，取出酶標板條。
標準品孔加入不同濃度標準品 50μL，樣本孔加入預處理樣本 50μL，空白孔加入稀釋液 50μL。
每孔加入酶結合試劑 100μL，密封酶標板，37℃孵育 72min。
洗板 5 次，每輪加滿洗滌液浸泡 32s，甩干液體后吸水紙拍板。
避光加入顯色 A、B 底物各 50μL，37℃避光顯色 20min。
加入終止液 50μL 終止酶促反應，輕板混勻。
450nm 測 OD 值，擬合標準曲線定量 MMP-8 含量。
關鍵字： 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細胞膠原酶;MMP-8;ELISA試劑盒;
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