本試劑盒采用特異性雙抗體夾心酶免疫檢測原理，預(yù)先在酶標(biāo)板包被大鼠TIMP-3捕獲抗體，孵育時可特異性結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)品及待測樣本中的TIMP-3抗原。洗滌去除未結(jié)合組分后，加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的檢測抗體，形成免疫夾心復(fù)合物，隨后進行底物顯色與終止反應(yīng)。檢測所得吸光度值與樣本中TIMP-3含量呈線性相關(guān)，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線即可完成樣本中TIMP-3的定量檢測。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1527 |
英文名稱 | TIMP-3 ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測濃度≤0.1ng/mL
檢測范圍：0.2ng/mL - 8ng/mL
反應(yīng)時間：總反應(yīng)時長130min（樣本孵育70min、酶孵育30min、顯色30min）
保存條件：2-8℃避光保存，標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶后建議一次性使用，避免失效
有效期：未開封12個月
顯色系統(tǒng)：TMB-H2O2顯色體系，酸性終止
檢測波長：450nm，620nm校正
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：6濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)品上機，四參數(shù)擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線，R2≥0.990
特異性：特異性靶向大鼠TIMP-3，與其他TIMP亞型無交叉識別
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤8%，板間CV≤11%
注意事項：樣本需無溶血、無渾濁，溶血樣本會嚴(yán)重干擾檢測結(jié)果
關(guān)鍵注意事項：
本試劑盒僅科研體外檢測，嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實驗廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。
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實驗操作流程：
所有組分室溫平衡 27min，配制洗滌工作液，梯度稀釋 TIMP-3 標(biāo)準(zhǔn)品，取出對應(yīng)酶標(biāo)板條。
標(biāo)準(zhǔn)孔加梯度濃度標(biāo)準(zhǔn)品 50μL，樣本孔加入稀釋后樣本 50μL，空白孔補稀釋液。
全孔加入酶結(jié)合液 100μL，封板封口，37℃孵育 56min。
洗板 4 次，洗液浸泡 27s 每次，甩干液體后拍干板孔。
避光加入顯色 A、B 液各 50μL，37℃避光顯色 12min。
加入終止液 50μL 混勻終止。
450nm 檢測吸光度，換算 TIMP-3 樣本含量。
關(guān)鍵字： 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3;TIMP-3;ELISA試劑盒;
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