本試劑盒基于經(jīng)典雙抗體夾心ELISA原理，酶標(biāo)板固相固定抗大鼠TIMP-4特異性抗體，能夠特異性識別并結(jié)合樣本中的TIMP-4抗原分子。經(jīng)樣本孵育、洗板去除非特異性結(jié)合物質(zhì)后，加入酶標(biāo)記檢測抗體形成三元免疫復(fù)合物，通過底物顯色反應(yīng)放大檢測信號。顯色強(qiáng)度對應(yīng)TIMP-4蛋白含量，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合計算，可精準(zhǔn)定量大鼠各類樣本中TIMP-4的濃度。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1528 |
英文名稱 | TIMP-4 ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測濃度≤0.11ng/mL
檢測范圍：0.22ng/mL - 7.8ng/mL
反應(yīng)時間：總反應(yīng)時長125min（孵育95min、顯色30min）
保存條件：2-8℃干燥冷藏，所有試劑分開密封存放，防止交叉污染
有效期：原裝試劑盒12個月
顯色系統(tǒng)：優(yōu)化TMB顯色系統(tǒng)，背景低、重復(fù)性好
檢測波長：450nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：梯度標(biāo)準(zhǔn)品檢測OD值，四參數(shù)擬合曲線定量
特異性：特異性結(jié)合大鼠TIMP-4，無家族交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤9%，板間CV≤10%
注意事項(xiàng)：孵育過程避免微孔板晃動，防止液體溢出、結(jié)合不均
儲存與有效期：
未開封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個月。
開封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個月內(nèi)使用。
過期試劑禁止使用。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑盒室溫靜置 31min，稀釋洗滌液，復(fù)溶稀釋 TIMP-4 標(biāo)準(zhǔn)品，拆分酶標(biāo)板條備用。
設(shè)置三類反應(yīng)孔，標(biāo)品孔加梯度標(biāo)準(zhǔn)品 50μL，樣本孔上樣 50μL 待測液，空白孔加稀釋緩沖液。
每孔加入酶標(biāo)記工作液 100μL，覆膜密封，37℃孵育 64min。
洗板 5 次，每次加滿洗滌液浸泡 31s，棄液拍干微孔殘留液體。
避光添加顯色 A、B 液各 50μL，37℃避光顯色 16min。
加入終止液 50μL 終止顯色反應(yīng)，震蕩混勻。
450nm 讀取 OD 值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計算 TIMP-4 濃度。
關(guān)鍵字： 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4;TIMP-4;ELISA試劑盒;
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