本試劑盒基于雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附原理，酶標(biāo)板預(yù)先包被紅螯光殼螯蝦卵黃脂磷蛋白/卵黃磷蛋白（Lv/Vn）特異性捕獲抗體，待測(cè)樣本中的Lv/Vn抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗滌去除未結(jié)合組分后，加入酶標(biāo)記檢測(cè)抗體形成免疫夾心復(fù)合物，底物顯色后的吸光度值與樣本中Lv/Vn含量呈正相關(guān)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線可定量檢測(cè)該蛋白的表達(dá)含量。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 紅螯光殼螯蝦卵黃脂磷蛋白/卵黃磷蛋白(Lv/Vn)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E3410 |
英文名稱 | Lv/Vn ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測(cè)值0.11ng/mL，精準(zhǔn)檢測(cè)螯蝦性腺、血清中Lv/Vn微量蛋白。
檢測(cè)范圍：0.22ng/mL - 90ng/mL，覆蓋螯蝦繁殖周期內(nèi)蛋白表達(dá)濃度變化區(qū)間。
反應(yīng)時(shí)間：總實(shí)驗(yàn)時(shí)長(zhǎng)95分鐘，水產(chǎn)無(wú)脊椎動(dòng)物樣本專屬孵育45分鐘，顯色20分鐘。
保存條件：2-8℃避光冷藏保存，蛋白抗體組分密封防潮，防止降解。
有效期：未拆封有效期11個(gè)月。
特異性：特異性結(jié)合紅螯光殼螯蝦Lv/Vn，與其他蝦類卵黃蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤5%，板間CV≤7%，水產(chǎn)繁殖生理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)一致性高。
注意事項(xiàng)：螯蝦樣本需新鮮解剖提取，水體雜質(zhì)、組織碎屑需徹底清除。
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測(cè)依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑盒室溫平衡 30min，稀釋濃縮洗滌液，拆分微孔板條，多余板條密封冷藏避光保存。
Lv/Vn 標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋，螯蝦卵巢組織勻漿上清稀釋過濾，每孔加 50μL 樣本或標(biāo)準(zhǔn)稀釋液。
一步添加酶標(biāo)特異性抗體 100μL，封板膜密封酶標(biāo)板孔口。
37℃避光孵育 65min，固相載體捕獲目標(biāo)蛋白形成免疫復(fù)合物。
洗板 5 次，每次注滿洗滌液靜置 32s，倒扣板條拍干廢液。
避光滴加顯色 A 液、B 液各 50μL，輕微震蕩混勻，37℃顯色 16min。
終止液終止顯色反應(yīng)，酶標(biāo)儀 450nm 測(cè)定吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算 Lv/Vn 蛋白含量。
關(guān)鍵字： 紅螯光殼螯蝦卵黃脂磷蛋白/卵黃磷蛋白;Lv/Vn;ELISA試劑盒;
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