本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測原理,微孔板包被魚卵黃高磷蛋白特異性抗體,樣本中的魚卵黃高磷蛋白與固相抗體特異性結(jié)合,匹配酶標(biāo)檢測抗體形成免疫夾心結(jié)構(gòu),經(jīng)顯色反應(yīng)后,吸光度值與樣本中目標(biāo)蛋白含量成正比,可精準(zhǔn)測定魚卵黃高磷蛋白含量。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 魚卵黃高磷蛋白ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E3398 |
英文名稱 | PV ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最低檢測限0.06μg/mL,可精準(zhǔn)檢測魚類卵黃高磷蛋白微量表達(dá)
檢測范圍:0.1μg/mL - 40μg/mL,適配魚類卵巢、魚卵、血清樣本檢測
反應(yīng)時間:全流程105分鐘,蛋白抗原結(jié)合充分,結(jié)果穩(wěn)定
保存條件:2-8℃密封避光保存,酶結(jié)合物單獨(dú)避光存放
有效期:原裝有效期12個月,常規(guī)儲存合規(guī)有效
特異性:特異性識別魚類卵黃高磷蛋白,與卵黃脂磷蛋白、其他魚類蛋白無交叉反應(yīng)
重復(fù)性:板內(nèi)CV≤5%,板間CV≤7%,批次一致性好
注意事項:魚卵樣本充分勻漿、離心去除油脂雜質(zhì);避免樣本高溫放置,防止蛋白變性;洗板徹底,降低背景吸光度。
關(guān)鍵注意事項:
實驗前需仔細(xì)閱讀對應(yīng)試劑盒的說明書,不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光,避免陽光直射影響結(jié)果
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實驗操作流程:
試劑室溫平衡 35min,配制洗滌液,魚卵組織勻漿離心取上清稀釋,酶標(biāo)板拆分標(biāo)記對照、標(biāo)準(zhǔn)品、樣品孔。
各孔加入梯度卵黃高磷蛋白標(biāo)準(zhǔn)品、稀釋待測樣本,空白孔添加稀釋液,加樣槍頭一孔一換。
一步法添加酶標(biāo)記特異性抗體,封板密封微孔板,震蕩混勻體系。
37℃避光孵育 68min,保證夾心反應(yīng)完全。
廢液傾倒后洗板 5 次,每次浸泡 30s,拍干去除殘留洗滌液。
TMB 顯色液避光顯色 21min,觀察顯色梯度差異。
終止液終止顯色,混勻后上機(jī)讀數(shù),標(biāo)準(zhǔn)曲線定量目標(biāo)蛋白濃度。
關(guān)鍵字: 魚卵黃高磷蛋白;ELISA試劑盒;
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