本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測(cè)技術(shù)，酶標(biāo)板微孔內(nèi)包被家蠶卵黃蛋白（LT）特異性捕獲抗體，待測(cè)樣本中的LT抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗去未結(jié)合雜質(zhì)后，加入酶標(biāo)記特異性檢測(cè)抗體形成完整的免疫夾心復(fù)合物，經(jīng)TMB底物顯色反應(yīng)后，顯色深淺與樣本中家蠶卵黃蛋白含量呈正相關(guān)，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線可精準(zhǔn)定量其表達(dá)水平。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 家蠶卵黃蛋白(LT) ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E3414 |
英文名稱 | LT ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢出濃度0.08ng/mL，精準(zhǔn)檢測(cè)家蠶不同發(fā)育階段LT微量蛋白。
檢測(cè)范圍：0.16ng/mL - 80ng/mL，覆蓋家蠶產(chǎn)卵、發(fā)育周期內(nèi)LT表達(dá)濃度。
反應(yīng)時(shí)間：總實(shí)驗(yàn)時(shí)長(zhǎng)90分鐘，昆蟲(chóng)樣本孵育40分鐘，顯色20分鐘。
保存條件：2-8℃避光密封保存，昆蟲(chóng)蛋白試劑防潮防降解。
有效期：未拆封有效期11個(gè)月。
特異性：專一識(shí)別家蠶卵黃蛋白LT，與其他昆蟲(chóng)卵黃蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤5%，板間CV≤7%，蠶學(xué)科研實(shí)驗(yàn)重復(fù)性良好。
注意事項(xiàng)：家蠶樣本低溫保存，常溫放置易導(dǎo)致LT蛋白降解，影響檢測(cè)結(jié)果。
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測(cè)依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過(guò)程中防止污染和揮發(fā)
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑盒室溫平衡 28min，配制洗滌工作液，取用微孔板條，剩余板條密封冷藏。
LT 標(biāo)準(zhǔn)品倍比稀釋，家蠶卵勻漿上清稀釋過(guò)濾，每孔加 52μL 待測(cè)液或標(biāo)準(zhǔn)稀釋液。
直接向各檢測(cè)孔滴加酶標(biāo)抗體工作液 108μL，封板避光放置。
37℃孵育 59min，完成夾心式一步 ELISA 結(jié)合。
手工洗板 4 次，洗滌液浸泡 33s 后拍干廢液。
避光添加顯色底物混合液 100μL，37℃顯色 13min。
加入終止液終止顯色，酶標(biāo)儀 450nm 測(cè)定 OD 值，計(jì)算卵黃蛋白 LT 表達(dá)量。
關(guān)鍵字： 家蠶卵黃蛋白;LT;ELISA試劑盒;
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